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ENST00000418539.1调控miR-24对H_2O_2诱导心肌细胞氧化应激损伤的影响

张明磊  杨清泉  李贞彩  王星  张一帆  
【摘要】:目的探讨长链非编码RNA ENST00000418539.1(LncRNA ENST00000418539.1)是否通过调控miR-24的表达影响过氧化氢(H_2O_2)诱导心肌细胞氧化应激损伤。方法体外培养大鼠心肌细胞H9c2,200μmol/L H_2O_2处理心肌细胞48 h建立模型,分别将乱序无意义阴性序列(si-NC)、ENST00000418539.1小分子干扰RNA(si-ENST00000418539.1)、si-ENST00000418539.1与阴性对照(anti-miR-NC)、si-ENST00000418539.1与miR-24特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-24)转染至心肌细胞,使用H_2O_2处理心肌细胞。实时荧光定量聚合酶链反应检测ENST00000418539.1、miR-24的表达量;流式细胞术检测细胞凋亡率;检测丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)水平;双荧光素酶报告实验验证ENST00000418539.1、miR-24的靶向关系;蛋白免疫印迹法检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶9(Caspase-9)的表达。结果与对照组比较,模型组细胞凋亡率明显升高(P0.05),Caspase-3、Caspase-9蛋白水平明显升高(P0.05),MDA、LDH水平明显升高(P0.05);与模型组、si-NC组比较,si-ENST00000418539.1组细胞凋亡率明显降低(P0.05),Caspase-3、Caspase-9蛋白水平明显降低(P0.05),MDA、LDH水平明显降低(P0.05);双荧光素酶报告实验证实ENST00000418539.1可靶向结合miR-24。与si-ENST00000418539.1+anti-miR-NC组比较,si-ENST00000418539.1+anti-miR-24组细胞凋亡率明显升高(P0.05),Caspase-3、Caspase-9蛋白水平明显升高(P0.05),MDA、LDH水平明显升高(P0.05)。结论干扰ENST00000418539.1表达可负向调控miR-24的表达,从而抑制H_2O_2诱导心肌细胞凋亡及减轻氧化应激损伤。

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6 编译 晓鱼;人类心肌细胞可再生[N];医药经济报;2009年
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