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人参皂苷Rh2调节TNF/MAPK和NF-κB信号通路抑制TGF-β1诱导的LX-2细胞活化

蔡强  于婷  唐海姣  张荣  杨蕾  王宗权  
【摘要】:目的 评估人参皂苷 Rh2 对转化生长因子 β1(TGF-β1)诱导的 LX-2 细胞活化的药理作用,并阐明 Rh2抗纤维化的作用机制。方法 人肝星状细胞(HSC)细胞系 LX-2 采用 TGF-β1(10 ng·mL~(-1))诱导建立肝纤维化细胞模型,通过 CCK-8 法检测 LX-2 细胞的生长曲线和 Rh2 对细胞的毒性;Western Blot 检测 LX-2 细胞中 α-SMA、结蛋白(Desmin)、波形蛋白(Vimentin)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶 2(COX2)、肿瘤坏死因子受体 1(TNFR1)、核因子 κB(NF-κB)P65、p-P65、p-IκBα、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、p-ERK、应激活化蛋白激酶(JNK)、p-JNK、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)p38、p-p38 蛋白表达的相对含量。结果 LX-2 细胞接种密度为每毫升 2.5×10~4个细胞,接种 48 h 后进行实验,其中 10 μg·mL~(-1)和 20 μg·mL~(-1)的 Rh2 不影响细胞活力;Rh2 能抑制 TGF-β1 诱导 LX-2 细胞中α-SMA、Desmin、Vimentin 的表达(P0.01),减少炎症因子 TNF-α、IL-6、IL-1β 的表达(P0.05),且能降低 iNOS、COX2 的表达(P0.01)以及调节 TNF/MAPK 和 NF-κB 信号通路中蛋白的表达(P0.01)。结论 人参皂苷 Rh2 可以通过调节 TNF/MAPK 和 NF-κB 信号通路减轻炎症反应,从而抑制 TGF-β1 诱导的 LX-2 细胞肝纤维化。

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