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黄芩苷对转化生长因子β1诱导的A549细胞自噬作用的影响

王栋  陈召慧  陈海红  徐梦真  巩丽丽  许艳  朱庆均  
【摘要】:目的探讨黄芩苷对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的A549细胞自噬作用的影响。方法采用不同浓度TGF-β1(2.5、5、10 ng·mL~(-1))诱导A549细胞48 h后,检测其Collagen I基因与自噬相关基因表达水平,以确定模型复制的最佳条件。在高、中、低剂量(200、100、50μg·mL~(-1))黄芩苷对TGF-β1诱导的A549细胞模型干预后,采用RT-qPCR法检测细胞的肺纤维化标志基因CollagenⅠ及自噬相关基因(ATG3、ATG5、ATG7、ATG12)的表达;Western Blot法检测自噬调节标志蛋白p62、LC3BⅡ/Ⅰ的表达;通过转染Ad-mCherry-GFPLC3B双荧光标记腺病毒检测细胞中自噬流的情况。结果使用10 ng·mL~(-1)TGF-β1诱导A549细胞48 h后,CollagenⅠ基因表达显著上调,ATG3、ATG5、ATG7、ATG12基因表达明显下调,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。经黄芩苷干预后,与模型组相比,黄芩苷高剂量组(200μg·mL~(-1))A549细胞的CollagenⅠ基因表达显著下调(P0.01),ATG3、ATG5、ATG7、ATG12基因表达明显上调(P0.05);黄芩苷各给药组A549细胞的p62蛋白表达显著下调(P0.05,P0.01),LC3BⅡ/Ⅰ蛋白表达显著上调(P0.05,P0.01);黄芩苷高剂量组的细胞自噬能力明显激活。结论黄芩苷可能在减少TGF-β1诱导的A549细胞外基质沉积的同时,能够增强细胞的自噬水平,可能是治疗肺纤维化的有效成分。

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