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一种简单的慢病毒载体介导的同时沉默双基因的方法

左雨娜  焦德敏  于慧慧  张铸业  李宙阳  袁军  刘爱和  王彦刈  
【摘要】:目的建立一种简单的慢病毒载体介导的同时沉默双基因的方法。方法该研究在慢病毒载体的3'LTR区同时插入沉默两个基因p18和MAD1的shRNA(Small hairpin RNA),通过包装细胞293T和包装质粒包装成假病毒颗粒,感染NIH/3T3细胞。其沉默基因的效果用Western blotting来检测。结果载体构建成功,被感染的NIH3T3细胞中,p18和MAD1基因的蛋白表达被显著抑制。结论该载体构建方法操作简单,无需PCR,及多次连接反应,且可达到两种基因同时被稳定、高效沉默的目的,为相关研究提供了方便。

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