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低氧诱导因子1α在大鼠跟腱创伤后异位骨化模型中的表达及意义

喻都  肖海军  薛锋  潘明芒  鞠金勇  唐果  
【摘要】:目的检测低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor lα,HIF-lα)在大鼠跟腱创伤后异位骨化模型中早期表达情况,探讨HIF-lα及低氧微环境在创伤后异位骨化发病机制中的作用及意义。方法取8~10周龄雄性SD大鼠140只,体质量(210.1±10.6)g,随机分为实验组及对照组(n=70)。实验组通过跟腱钳夹、切断法制备创伤后异位骨化模型,对照组仅暴露跟腱,跟腱不作任何处理。术后观察两组大鼠一般情况,于2、3、4、5、6、7、8、10、12、14 d两组各处死6只大鼠,取跟腱及周围组织行大体、组织学及免疫组织化学染色观察,以及采用实时荧光定量PCR和Western blot检测不同时间点HIF-lα的基因及蛋白表达情况。两组剩余大鼠于术后10周摄X线片,取跟腱及其周围组织行组织学染色观察,综合评价异位骨化形成情况。结果术后3 d实验组1只大鼠死亡,其余大鼠均存活至实验完成。大体及组织学染色观察示:各时间点对照组大鼠跟腱及其周围组织无明显变化,呈正常跟腱结构;实验组大鼠跟腱断端萎缩,坏死,有炎性细胞浸润;随时间延长,跟腱断端出现硬结,且硬度不断增加,有大量不规则结缔组织及软骨细胞。实时荧光定量PCR和Western blot检测示:与对照组相比,各时间点实验组HIF-lα基因及蛋白相对表达量均显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。免疫组织化学染色示实验组HIF-lα呈阳性。结合术后10周X线片及组织学观察结果,实验组均发生异位骨化,对照组无异位骨化发生。结论大鼠跟腱创伤后异位骨化早期,HIF-lα表达明显升高,提示局部低氧微环境在创伤后异位骨化发病机制中起重要作用。

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