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南松大小蠹TaqMan实时荧光定量PCR检测

刘嘉欢  蔡波  敖苏  李猷  徐卫  徐淼锋  林伟  孟瑞  
【摘要】:南松大小蠹是我国重要的一种检疫性有害生物,我国在进口木材检疫中多次截获这种昆虫,但传统的形态学鉴定方法难以对部分虫态如卵、幼虫及残缺的成虫进行准确鉴定。为了对南松大小蠹进行快速准确地鉴定,本研究根据mtDNA COI基因序列设计了一组特异性引物和TaqMan-MGB探针,结合TaqMan实时荧光定量PCR技术,验证了其特异性引物对和探针组合的特异性。结果表明:以黄杉大小蠹、红脂大小蠹、红翅大小蠹、华山松大小蠹、黑脂大小蠹和钝贵小蠹作为对照,仅南松大小蠹存在特异性扩增曲线;同时灵敏度检测结果显示当DNA模板浓度≥0.008 8 ng/μL时可产生南松大小蠹特异性荧光信号,成功实现了对南松大小蠹的快速、准确的分子鉴定。

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