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抗脂肪细胞40000特异膜蛋白scFv-Fc融合抗体毕赤酵母表达载体的构建

高士争  尹革芬  张玉静  汪磊  张曦  
【摘要】:采用RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞克隆IgG1Fc片段基因,经序列分析表明,该Fc片段基因长699bp,具有完整的铰链区、CH2和CH3结构区,与GenBank中人IgG1重链Fc片段基因序列完全相同。将Fc片段基因与pPICZαA酵母载体连接先构建pPIgG1质粒,然后将抗脂肪细胞40000特异膜蛋白的噬菌体scFv抗体基因插入到pPIgG1质粒,构建pPIgG1-scFv酵母表达载体。序列分析表明,scFv基因与Fc片段基因拼接正确,阅读框正确无误,表明成功构建了抗脂肪细胞40000特异膜蛋白scFv-Fc融合抗体毕赤酵母表达载体。本试验为下一步在毕赤酵母中大量表达与IgG结构相似、具有较高亲和力和生物活性的scFv-Fc融合抗体分子奠定了基础。

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