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鉴别狂犬病病毒强弱毒株中和性单克隆抗体的制备及初步应用

张茂林  侯世宽  马从林  扈荣良  钱爱东  刘政军  金宁一  殷震  
【摘要】:为获得对狂犬病病毒弱毒疫苗株筛选和糖蛋白抗原结构分析的单克隆抗体,将鹿狂犬病病毒 8202 株在适宜的条件下培养 72 h,收集无细胞上清,经离心沉淀、 Zn ( A C)2 浓缩、10% ~50% 质量浓度的蔗糖密度梯度离心纯化、 S D S P A G E 分析证明,产物中富含狂犬病病毒特异的结构蛋白。以上述纯化病毒免疫 B A L B/c 小鼠的脾细胞与 S P2/0 骨髓瘤细胞融合,经 3~5 次克隆,间接 E L I S A 筛选, W estern blotting 鉴定,并与不同科病毒反应,建立了 2 株(4 A5 ,3 A5 )可稳定分泌抗狂犬病病毒 G 蛋白的杂交瘤细胞株。这 2 株 M c Ab 与 4株狂犬病病毒反应,经间接 E L I S A 检测,发现能与强毒株反应,而与弱毒株不反应。细胞中和试验证实,这 2株 M c Ab 具有良好的细胞中和活力。

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