收藏本站
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

活的非可培养状态副溶血性弧菌实时荧光逆转录PCR检测方法的建立及其毒力研究

刘静宇  凌莉  邓翼惠  易敏英  胡科锋  陈碧玲  
【摘要】:目的建立检测活的非可培养(VBNC)状态副溶血性弧菌的荧光逆转录PCR方法并研究其毒力基因表达。方法将副溶血性弧菌AS079菌株添加到陈化海水中,4℃冰箱内培养,使其进入VBNC状态,针对其管家基因、鉴定基因和毒力基因分别设计实时荧光逆转录PCR引物,通过不同的PCR反应程序和引物浓度组合试验,摸索最佳反应体系条件,用于VBNC状态副溶血性弧菌的检测和毒力研究。结果用所建立的检测VBNC状态副溶血性弧菌的实时荧光逆转录PCR方法,对接种于陈化海水培养的不同时期的AS079副溶血性弧菌进行荧光定量逆转录PCR扩增,结果显示,随着培养时间的延长,毒力基因tdh2和鉴定基因toxR表达水平持续下降,但即使细菌进入VBNC状态,这两个基因也能够得到很好的扩增,说明以toxR基因和tdh2基因对进入VBNC状态的副溶血性弧菌进行检测和毒力研究方法可行。灵敏度试验表明,鉴定基因toxR的最低检测限可达到48 cfu/ml,研究毒力基因tdh2的表达需要细菌浓度至少为4.8×102cfu/ml,同时试验证明此方法与其他相近食源性致病菌无交叉反应。结论该实时荧光逆转录PCR方法检测快速、特异性强、敏感度高,适用于VBNC状态副溶血性弧菌的检测和毒力分析。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 余立;;一起副溶血性弧菌食物中毒调查[J];中国热带医学;2006年12期
2 卢俊;;一起副溶血性弧菌引起食物中毒的调查分析[J];公共卫生与预防医学;2008年02期
3 曲美媛;王永会;;一起副溶血性弧菌引起的食物中毒调查[J];中国校医;2008年03期
4 陈绍强;董华胜;张大帆;陈维典;;一起副溶血性弧菌食物中毒调查[J];浙江预防医学;2008年11期
5 葛津锦;金奕;;一起副溶血性弧菌食物中毒调查[J];浙江预防医学;2010年08期
6 何浙生;王满琴;潘幸福;倪诚潭;毛文祥;;浙江沿海鱼贝类及外环境中副溶血性弧菌检出频度及菌群分布[J];中国公共卫生;1989年10期
7 潘幸福;;多型副溶血性弧菌混合感染引起5起集体性食物中毒[J];浙江预防医学;1991年06期
8 王制宪,陆逸;一起副溶血性弧菌引起的食物中毒调查[J];上海预防医学杂志;2005年07期
9 林咸才;林海霞;;一起学校副溶血性弧菌食物中毒调查[J];浙江预防医学;2006年04期
10 韦海标;秦忠营;何德辉;徐志良;陆汉明;邵玉兰;;一起由副溶血性弧菌引起食物中毒的调查报告[J];应用预防医学;2006年S1期
11 孙永祥;丁水军;汪健;;一起O3:K6型副溶血性弧菌引起的食物中毒实验室分析[J];中国卫生检验杂志;2007年01期
12 梁婕;周炎冲;;一起副溶血性弧菌食物中毒调查[J];浙江预防医学;2007年04期
13 陈献文;;1起副溶血性弧菌引起的学生食物中毒调查[J];江苏卫生保健;2007年03期
14 马才良;孙扣红;;一起副溶血性弧菌食物中毒调查[J];浙江预防医学;2008年05期
15 周鉴;;一起职工食堂副溶血性弧菌食物中毒调查[J];浙江预防医学;2009年01期
16 郑春梅;郑彬;曹小俊;;一起副溶血性弧菌食物中毒的调查分析[J];中国校医;2009年03期
17 戴晓爱;;一起副溶血性弧菌食物中毒实验室检测[J];浙江预防医学;2009年10期
18 陆玉蛟;解艳秋;李柳春;韦志萍;;副溶血性弧菌引起食物中毒调查[J];疾病监测与控制;2009年04期
19 周庆荣;;一起副溶血性弧菌食物中毒调查[J];浙江预防医学;2010年03期
20 李月华;叶菊莲;韦俊超;;一起副溶血性弧菌食物中毒的实验室检测[J];浙江预防医学;2010年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘佛民;刘礼平;谭海玲;马聪;陈文胜;罗建波;;食品中副溶血性弧菌检测能力验证研究[A];2010广东省预防医学会学术年会资料汇编[C];2010年
2 潘礼春;;一起副溶血性弧菌、变形杆菌双重污染引起的食物中毒调查报告[A];新世纪预防医学面临的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集[C];2002年
3 张凡非;杉山宽治;西尾智裕;乡田淑明;秋山真人;;检测环境样品及食品中病原性副溶血性弧菌的研究[A];新世纪预防医学面临的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集[C];2002年
4 龙诚;罗书全;何源;;一起副溶血性弧菌食物中毒的调查与分析[A];重庆市营养学会学术会议论文汇编[C];2010年
5 李光辉;;一起寿宴引起的副溶血性弧菌食物中毒调查[A];重庆市预防医学会2006年学术交流会论文集[C];2006年
6 龙诚;蒲洪泉;何源;;一起副溶血性弧菌食物中毒的流行病学调查分析[A];重庆市预防医学会2009年论文集[C];2009年
7 叶冰鸿;金春秋;张志方;梁素云;;一起副溶血性弧菌引发食物中毒的调查报告[A];应对突发公共卫生事件论坛论文集[C];2005年
8 程苏云;张俊彦;王赞信;童贵忠;石亚素;;海水产品副溶血性弧菌污染定量检测分析[A];应对突发公共卫生事件论坛论文集[C];2005年
9 何荣生;陈丹青;;企业员工集体聚餐发生食物中毒的调查[A];华东地区第十次流行病学学术会议暨华东地区流行病学学术会议20周年庆典论文汇编[C];2010年
10 严卫星;李凤琴;;食品卫生学[A];2007-2008公共卫生与预防医学学科发展报告[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 巢国祥;副溶血性弧菌传播特征、O3:K6流行克隆分子生物学特性及多位点序列种群遗传研究[D];扬州大学;2010年
2 孙智勇;食源性致病菌高通量悬浮芯片检测技术研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年
3 毛雪丹;2003-2008年我国细菌性食源性疾病流行病学特征及疾病负担研究[D];中国疾病预防控制中心;2010年
4 贺晨;多重PCR结合基因芯片技术检测国境口岸蜚蠊携带病原菌的应用研究[D];吉林大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 田金玲;模拟蟹肉中副溶血性弧菌生长预测模型的建立及应用[D];广东海洋大学;2010年
2 黄弦;副溶血性弧菌检测方法评价与环境分离株携带基因特征研究[D];南方医科大学;2011年
3 韩海红;副溶血性弧菌全基因组DNA芯片和比较基因组学研究[D];中国疾病预防控制中心;2009年
4 卢晓凤;蛤肉中副溶血性弧菌风险评估体系初探[D];山东农业大学;2007年
5 王宏萍;水产品中致病性副溶血性弧菌的检测[D];重庆医科大学;2009年
6 李毅;温州地区食品中五种主要致病菌的调查分析[D];浙江大学;2010年
7 邱晋;食品中常见病原菌快速检测系统的研究[D];四川大学;2007年
8 方伟;2004~2007年广东省副溶血弧菌血清分型、分子特征及溯源研究[D];暨南大学;2009年
9 倪治明;浙北地区餐饮业小龙虾重点危害因子调查及风险评估[D];浙江大学;2013年
10 张凡非;海水海泥中病原性副溶血性弧菌时间分布及检出方法比较研究[D];山西医科大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 孙燕明;家嘉缘所售水饺导致食物中毒谁之过[N];中国消费者报;2004年
2 全国12320管理中心副主任 李蓉;防中毒 吃海鲜时多用醋[N];健康报;2010年
3 沈汝发;专家提醒贝类产品不宜生吃[N];中国消费者报;2004年
4 东方;吃螃蟹有讲究[N];江苏科技报;2003年
5 邓泽行;秋吃螃蟹有讲究[N];中国石油报;2003年
6 山东省莱州市慢性病防治院 郭旭光;雕花碟菜最不卫生[N];健康时报;2009年
7 沈汝发 吴鹤年;微生物超标,不宜生吃贝类[N];科技日报;2004年
8 唐大寒;秋吃螃蟹有禁忌[N];大众卫生报;2003年
9 依闻;夏日腹泻 病菌作怪[N];医药经济报;2002年
10 本报记者 王峰;生吃海鲜防中毒[N];中国消费者报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978