重组牛γ-干扰素单克隆抗体的研制

【摘要】：为制备针对重组牛γ-干扰素(rBoIFN-γ)的单克隆抗体(mAb),以纯化的原核表达融合蛋白rHis-BoIFN-γ为免疫原,用纯化的rGST-BoIFN-γ为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制抗rBoIFN-γ的mAb。结果获得13株稳定分泌抗BoIFN-γmAb的细胞株,命名为1C12、1F7、1G5、3E6、4D5、5E11、5G4、6F8、6G6、7E9、8D3、8F8和9G11。腹水的效价除单抗9G11外,其余效价都在1∶80 000以上;除5G4mAb亚类为IgG2b外,其余均为IgG1。Dot-ELISA结果表明,所得单抗只与融合蛋白rHis-BoIFN-γ和rGST-BoIFN-γ反应,而不与其它重组细胞因子和对照细菌反应,显示其良好的特异性。Western blot显示所获单抗能与相应的融合蛋白发生反应,出现特异性条带。同时所获单抗均能与牛IFN-γ标准品反应。13株单抗均为针对rBoIFN-γ的特异性mAb,为进一步研究rBoIFN-γmAb在牛的免疫调控、牛疫病的致病机制及其诊断中的应用奠定基础。

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中国期刊全文数据库

前10条

1	蒋耀青,陈雄风,刘澎涛,张乃昌;鱼类抗冻蛋白的研究——Ⅱ.黄盖鲽抗冻蛋白基因cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J];遗传学报;1990年03期
2	张智清,张颖,路秀华,王世骢,邵魁,马丽娟,李玉英,周圆,姚立红,贺秉坤,侯云德;人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子cDNA 5'端的修饰提高其在大肠杆菌的表达[J];病毒学报;1993年02期
3	陈卫平，李扬，王惠，曾毅;抗癌基因Rb在大肠杆菌中的表达[J];病毒学报;1994年01期
4	杨永平，江永珍，毕胜利，刘崇柏;丙型肝炎病毒基因组C区和NS3区基因cDNA的融合及其在大肠杆菌中的表达与初步应用[J];病毒学报;1994年03期
5	杨亚东，李岱宗，杨和平，王贵春，张晨晖，周爱儒，汤健，马大龙;人VEGFcDNA的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达[J];北京医科大学学报;1994年S1期
6	杨建琪，张锡元，李文鑫，张晓刚，王平;在大肠杆菌中利用反义RNA抑制乙肝病毒（HBV）X基因的表达[J];武汉大学学报(自然科学版);1995年04期
7	王艳林，刘巨洪，莽锐，程小款，吴宁华;人热休克因子原核表达及表达产物的研究[J];基础医学与临床;1996年03期
8	江国春,袁丽珍;人胎儿坐骨神经睫状神经营养因子的克隆[J];军事医学科学院院刊;1996年04期
9	张符光，刘佃辛，宋农，王新为，张兆山，马清钧;人胸腺素α原cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达[J];中国生物化学与分子生物学报;1996年04期
10	咸海青，范明，甘思德，刘淑红，丁爱石;人睫状神经营养因子的原核表达、纯化及其生物效应[J];中国应用生理学杂志;1996年01期

中国重要会议论文全文数据库

前10条

1	陈烨;王继德;周殿元;张兆山;;幽门螺杆菌粘附素基因hpaA的克隆、序列分析及原核表达[A];中国中西医结合学会第十二次全国消化系统疾病学术研讨会论文汇编[C];2000年
2	施理;张亚历;张振书;张万岱;周殿元;;H.pylori尿素酶A或B亚单位基因PCR扩增及其原核表达[A];中国中西医结合学会第十二次全国消化系统疾病学术研讨会论文汇编[C];2000年
3	吴贝贝;张竞;俞梅敏;茹炳根;;拟南芥中类MT蛋白基因的原核表达和类MT蛋白的结构功能分析[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
4	刘文;梁念慈;;重组人磷脂酰肌醇3-激酶 P110β催化亚基的原核表达[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
5	李英;马康涛;;BACE的克隆、原核表达和活性的初步分析[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
6	李宏;张宏誉;胡鸢雷;林忠平;;花生过敏原Arah_1的基因克隆与原核表达[A];第一届全国变态反应学术研讨会论文汇编[C];2001年
7	夏小兵;成军;杨继珍;钟彦伟;王刚;方宏清;刘研;李克;董菁;;抗HBsAg单链抗体靶向干扰素的构建及原核表达[A];中华医学会第七次全国感染病学术会议论文汇编[C];2001年
8	方佩华;何红鹏;吕枚;;hTPO抗原决定簇基因的原核表达及初步临床应用[A];中华医学会第六次全国内分泌学术会议论文汇编[C];2001年
9	张志友;方佩华;吕枚;高硕;;细胞间粘附分子-1膜外Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ功能区基因克隆和在大肠杆菌中的表达及其产品的初步应用[A];中华医学会第六次全国内分泌学术会议论文汇编[C];2001年
10	高永珍;黄可威;常智杰;;家蚕微孢子虫RAD37(RAD51 homolog)基因的克隆、原核表达与体外翻译[A];中国蚕学会第三届青年学术研讨会暨浙江省第二届青年学术论坛——蚕桑分论坛论文集（上册）[C];2001年

中国博士学位论文全文数据库

前10条

1	高永珍;家蚕微孢子虫主要极丝蛋白（PTP33）基因和RAD基因的克隆与分析[D];中国农业科学院;2001年
2	林同;舞毒蛾NPV多角体蛋白基因的克隆、测序和表达[D];东北林业大学;2001年
3	韩为东;一个新的白血病相关基因—LRP16的克隆、序列分析、表达特征及其生物学功能推测[D];军医进修学院;2001年
4	张芳琳;汉滩病毒M基因G2片段与S基因0.7Kb片段嵌合基因的表达及基因免疫的研究[D];第四军医大学;2001年
5	周艳春;人CD7 cDNA的克隆、表达及功能研究[D];第三军医大学;2001年
6	杨志林;恶性胶质瘤相关新基因的筛选、克隆及其特性研究[D];第一军医大学;2001年
7	李慎涛;猪肌生成抑制素cDNA的克隆、表达及其组织器官表达谱的研究[D];中国人民解放军军需大学;2001年
8	李续建;磷酸化应激诱导蛋白基因全长cDNA序列的克隆、表达、定位和功能研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
9	杨欣艳;人胃癌中Survivin基因的克隆与功能研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
10	苏凌云;致龋链球菌粘附、增殖相关基因的克隆、原核表达及功能初步研究[D];第四军医大学;2002年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	孔冬冬;烟草中叶绿体分裂相关基因ftsZ cDNAs的克隆及其在E.coli中的表达[D];首都师范大学;2000年
2	索桂英;马铃薯Y病毒NIa蛋白酶基因介导的抗病性研究[D];东北农业大学;2001年
3	张小霞;棉铃虫核多角体病毒iap2基因的克隆、测序及原核表达棉铃虫核多角体病毒Bam H I-F片段的序列分析[D];中国科学院武汉病毒研究所;2001年
4	秦卫松;穿孔素氨基端肽段的原核表达、抗体制备和信使核糖核酸的定量检测[D];第二军医大学;2001年
5	张焕铃;鸡、鸭法氏囊活性肽的生物学特性及其原核表达[D];河北农业大学;2002年
6	林林;玉米蚜和麦二叉蚜内共生菌groEL基因的克隆与原核表达[D];西北农林科技大学;2002年
7	樊小雪;香蕉束顶病毒中国漳州分离物DNA4编码区基因的克隆及原核表达[D];西北农林科技大学;2002年
8	唐漫书;猪白细胞介素-6基因的原核表达及免疫检测研究[D];四川大学;2002年
9	李霆;猪细小病毒VP_2蛋白主要抗原域的原核表达与表达产物纯化[D];南京农业大学;2002年
10	贺云霞;鹅细小病毒VP2基因的克隆、序列分析及原核表达[D];东北农业大学;2002年

中国重要报纸全文数据库

前7条

1	俞忠良;我国克隆出SARS病毒样颗粒[N];健康报;2003年
2	记者张颖伊洁;农林大学学生喜获“挑战杯”特等奖[N];福建日报;2005年
3	本报记者伊洁张颖;“挑战杯”的胜利者[N];福建日报;2005年
4	吴一福;我学者首次发现抗HBV末端蛋白杂交瘤细胞系[N];中国医药报;2006年
5	赵丽娜;TRAK1/MGb2抗原有望成为诊断胃癌的生物标志物[N];中国医学论坛报;2009年
6	本报首席记者任荃;一石三鸟“里葆多”[N];文汇报;2009年
7	宋冬　何玉玺;祖国的需要,就是我们最好的选择[N];科技日报;2009年

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