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天王补心丹加减通过orexin A/OX1R对慢性睡眠剥夺小鼠糖脂代谢的干预作用

黄晓宇  谢光璟  李浩  高寒  黄攀攀  
【摘要】:目的:从食欲素A(orexin A)/食欲素受体1(OX1R)信号通路探讨天王补心丹加减改善慢性睡眠剥夺小鼠糖脂代谢异常的作用机制。方法:6周龄雄性C57BL/6小鼠50只,随机分为空白组,模型组,艾司唑仑组及天王补心丹加减低、高剂量组,每组10只。对除空白组外采用多平台水环境法睡眠剥夺8周,后4周予天王补心丹水煎剂(8.5,17 g·kg-1)与艾司唑仑溶液(9.1 mg·kg-1)灌胃,空白、模型组灌服等体积纯水。每周测量2次小鼠摄食量与体质量;第49天尾静脉采血进行葡萄糖耐受实验(GTT),第52天尾静脉采血进行胰岛素耐受实验(ITT);应用全自动生化分析仪检测血清中总胆固醇(TCH),甘油三酯(TG)与游离脂肪酸(FFA)表达;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清及下丘脑中orexin A表达量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测下丘脑中OX1R mRNA和蛋白表达水平。结果:给药后各组小鼠的食物摄入量出现差异;与空白组比较,模型组体质量明显降低(P0.05),糖耐量出现明显异常,TCH,TG,FFA水平显著升高(P0.01),同时血清及下丘脑中orexin A表达量显著升高(P0.01),下丘脑中OX1R mRNA和蛋白表达水平显著升高(P0.01);与模型组比较,天王补心丹加减各组体质量明显升高(P0.05),具有更好的葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性,TCH,TG,FFA水平均明显降低(P0.05,P0.01),并伴有血清及下丘脑中orexin A表达量明显下降(P0.05,P0.01),OX1R的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P0.05,P0.01)。结论:天王补心丹加减可以保护慢性睡眠剥夺诱导的小鼠糖脂代谢异常,推测其机制可能与orexin A/OX1R信号表达下调有关。

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