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假单胞菌质粒抗汞基因的克隆

周桢林  陈琦  
【摘要】:采用pBR322为载体,将假单胞菌B-33抗汞质粒pBH33的抗汞基因,克隆至大肠杆菌C_(600)。在含25μg/ml四环素和30μg/ml HgCl_2的L—肉汤平板上生长的重组体中,筛选到一株能抗60μg/ml HgCl_2的抗汞基因克隆株——大肠杆菌C_(600)(pBH337)。重组质粒pBH337,经PstI酶解电泳分析和电镜观察表明,其分子量为6.1 kb,抗汞基因位于1.8kb长的PstI片段上。生长测定表明,克隆菌株可在含10μg/ml HgCl_2的L-肉汤中良好地生长,而受体大肠杆菌C_(600)则受到强烈抑制。汞挥发实验证明,抗汞基因克隆株C_(600)(pBH337),具有较强的去汞能力。

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