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蜱抗凝血肽与RGDS肽重组基因在毕赤酵母中的表达及活性分析

蒋香梅  叶彬  白垚  武卫华  郑玉强  
【摘要】:目的利用毕赤酵母表达系统进行蜱抗凝血肽-RGDS肽双功能分子重组基因的真核表达研究。方法首先将蜱抗凝血肽-RGDS肽双功能分子的重组基因的表达质粒pPIC9K/TAP经限制性内切酶SalⅠ酶切线性化后,电转化酵母菌株GS115感受态细胞,并经MD平板与MM平板、G418抗性筛选,PCR鉴定,得到重组酵母工程菌GS115/pPIC9K-TAP,经甲醇诱导分泌表达并对表达产物进行初步鉴定。结果蜱抗凝血肽-RGDS肽双功能分子重组基因在毕赤酵母中获得成功表达,表达产物有抗凝血因子活性和抗血小板的作用。结论蜱抗凝血肽-RGDS肽双功能分子重组基因在毕赤酵母中获得分泌性表达,表达产物显示抗凝血因子活性和抗血小板的作用。

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