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恶性疟原虫富组氨酸蛋白2的原核表达、纯化及表达产物的鉴定

李珣  薛采芳  缪军  甄荣芬  刘忠湘  
【摘要】:目的为将恶性疟原虫的富组氨酸蛋白2(HRP2)应用于疟疾诊断和疫苗研究,本文原核表达、纯化及鉴定了恶性疟原虫的HRP2。方法将HRP2基因片段克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,形成pGEX-4T-1/HRP2;诱导pGEX-4T1/HRP2转化的BL21菌,纯化表达产物并免疫BALB/C小鼠;以免疫色谱法鉴定表达产物,以免疫小鼠血清对受染红细胞(IRBC)进行Westemblot分析。结果成功构建了pGEX-4T-1/HRP2,经诱导表达出与GST融合的蛋白(约60KD),纯化后纯度达92%;HRP2特异性单抗可识别表达蛋白,免疫小鼠血清可识别IRBC中的原虫HRP2抗原。结论成功表达并纯化了HRP2蛋白,为深入研究和应用HRP2打下基础。

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