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在大肠杆菌中高效表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒p24蛋白

郭军庆  金宁一  毛春生  郭志儒  尹凤阁  殷震  
【摘要】:目的表达人Ⅰ型免疫缺陷病毒(HIV—1)衣壳蛋白p24,为制备抗p24单克隆抗体及其诊断杭原奠定基础。方法将编码HIV—1p24蛋白的P24(gag)基因片段,克隆到原核表达载体PET—17b的T7噬菌体启动子下游,构建重组表达质粒;转化大肠杆菌BL2(DE3),IPTG诱导表达,表达产物以SDS-PAGE、Westernblotting及点免疫印迹分析。结果构建成功重组表达质粒pET24,经IPG诱导,p24(gag)基因片段在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,产物为30kDa的810—p24融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的38.4%;重组p24蛋白均与抗p24单克隆抗体及HIV—1阳性血清发生特异性反应。结论重组P24蛋白具有较好的免疫活性,是制备抗P24单克隆抗体及诊断试剂的理想抗原。

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1 侯俊;HIV p24抗原的表达、单克隆抗体的制备和初步应用[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
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