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GDNF基因修饰的神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血的实验研究

杜杰  高小青  陈波  杨朝鲜  先雄斌  袁琼兰  
【摘要】:目的:观察转染胶质细胞源性神经营养因子(Glial cell derived neurotrophic factor,GDNF)基因的神经干细胞(Neuralstem cells,NSCs)移植在脑缺血大鼠脑组织的分布,探讨其神经保护作用。方法:体外培养新生大鼠NSCs,采用改良的线栓法制作脑缺血再灌注模型,3d后用脑立体定位仪分别经脑室移植生理盐水、NSCs和GDNF/NSCs。各组移植前及再灌注1~7周进行神经功能损伤程度评分(Neurological severity scores,NSS)。免疫组织化学方法观察移植后NSCs的存活及分布情况。结果:NSCs经GDNF基因转染后2d发绿色荧光,抗nestin免疫荧光检测呈阳性。GDNF/NSCs组与NSCs组NSS评分比较,在再灌注2周和3周显著降低(P0.05)。移植的NSCs分布于缺血侧皮质、纹状体,移植后3、5、7周,阳性细胞数分别较1、2周显著增多(P0.05)。GDNF/NSCs组与NSCs组比较,第2、3、5、7周纹状体、皮质阳性细胞数显著增多(P0.05)。从病理学上观察,GDNF/NSCs组神经毡较NSCs移植组致密。结论:移植GDNF基因修饰的神经干细胞能改善脑缺血大鼠神经功能,对脑缺血所致的损伤具有一定修复作用。

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