收藏本站
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

家蚕浓核病毒镇江株非结构蛋白2(NS2)的表达及活性研究

赵盼  唐顺明  刘挺  覃光星  郭锡杰  
【摘要】:【目的】对家蚕浓核病毒镇江株非结构蛋白2(NS2)基因进行克隆、表达,并测定表达产物的生物活性。【方法】利用PCR技术从家蚕浓核病毒镇江株(BmDNV-Z)基因组中扩增得到非结构蛋白2(NS2)基因片段,将其克隆到表达载体pET28a得到重组表达质粒pET28a-NS2,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,SDS-PAGE和Westernblot检测,表达产物经Ni柱纯化,经过复性检测其Helicase和ATPase活性。【结果】克隆获得了BmDNV-ZNS2基因,并在大肠杆菌中得到了成功表达,表达产物经Ni柱纯化获得了目的蛋白NS2。纯化的NS2蛋白具有Helicase活性,能将双链DNA底物解旋成为单链,并且具有一定的底物极性选择性,对于极性底物表现出更高的解旋活性。同时,纯化的NS2蛋白具有ATPase活性,其酶活力可达到0.276μmol·μg-1·h-1。【结论】BmDNV-ZNS2基因编码的病毒非结构蛋白具有Helicase和ATPase活性,并且Helicase活性具有一定的底物极性选择性,推测该基因在病毒DNA的复制过程中发挥重要作用。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈元霖,郑子修,叶文娟,李桂兰,吕慧梅;蚕类核酸的研究 1.氯仿去污剂法分离纯化蚕类DNA[J];动物学研究;1980年02期
2 ;家蚕有滞育期多化性品种生黑种发生规律研究[J];蚕业科学;1980年01期
3 曾锦标;家蚕染色体制片的几种方法[J];蚕业科学;1980年01期
4 夏邦颖;建议开展桑蚕育种新途径的研究[J];蚕业科学;1980年01期
5 夏建国;试论家蚕杂交育种的后代选择[J];蚕业科学;1980年02期
6 钱元骏,胡雪芳,戴仁鸣,巫爱珍,沈学仁,孙玉昆;家蚕质型多角体病毒的血清学研究——Ⅲ、中和试验和交叉反应[J];蚕业科学;1980年02期
7 蔡幼民,王红林,李素珍;家蚕人工饲料的研究:营养条件对蚕儿成长的影响[J];蚕业科学;1980年02期
8 夏建国,唐文月;家蚕性别与经济性状的关系[J];蚕业科学;1980年03期
9 李振刚,蔡志旭,刘瑞芝,范久戈;家蚕染色体的核型分析[J];蚕业科学;1980年03期
10 蔡幼民,王红林,李素珍;家蚕人工饲料的研究:饲料组成的改良[J];蚕业科学;1980年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 戴玉锦;;家蚕的内分泌及应用研究[A];中国动物科学研究——中国动物学会第十四届会员代表大会及中国动物学会65周年年会论文集[C];1999年
2 凌建华;陈元霖;;蚕类线粒体DNA(mt DNA)研究Ⅱ蓖麻蚕mtDNA限制性酶切图谱研究[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
3 何明亮;邱海英;靳嘉瑞;李载平;;蓖麻蛋rRNA基因转录调控区的特征结构[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
4 曹广力;贡成良;华刚;朱江;张志芳;吴祥甫;;在蚕体重用组家蚕核多角体病毒表达HCV的C及E1区基因[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
5 江坤荣;陆振荣;;PAS技术在农药污染中的研究及应用[A];中国化工学会农药专业委员会第八届年会论文集[C];1996年
6 赵东红;戴祝英;周开亚;张林元;;人工合成家蚕抗菌肽基因类CMIV在昆虫细胞中的表达(摘要)[A];纪念六足学会创建八十周年、江苏省昆虫学会四十周年论文集粹[C];2000年
7 徐进署;张双全;;抗菌肽CM4对真菌串珠链孢的杀伤作用研究(摘要)[A];纪念六足学会创建八十周年、江苏省昆虫学会四十周年论文集粹[C];2000年
8 时连根;徐俊良;;家蚕作为生物反应器的新用途开发研究(摘要)[A];中国蚕学会养蚕与蚕生理病理学术讨论会论文汇编[C];2000年
9 余红仕;鲁成;;昆虫杆状病毒表达载体系统的原理、技巧和进展[A];重庆市遗传学会第一届学术年会暨纪念孟德尔规律再发现100周年学术讨论会论文集[C];2000年
10 崔为正;李卫国;刘春英;张惠淄;季树敏;;小蚕颗粒人工饲料育的研究(摘要)[A];中国蚕学会养蚕与蚕生理病理学术讨论会论文汇编[C];2000年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈秀;外源基因在家蚕中的插入与表达研究[D];中国农业科学院;2000年
2 李斌;家蚕分子连锁图谱的构建和低分子量热激蛋白基因的克隆与特异表达[D];西南农业大学;2001年
3 朱勇;sch基因的遗传分析及在家蚕育种上的应用研究[D];西南农业大学;2001年
4 唐云明;家蚕超氧化物歧化酶的分离纯化及其基因克隆[D];西南农业大学;2001年
5 高永珍;家蚕微孢子虫主要极丝蛋白(PTP33)基因和RAD基因的克隆与分析[D];中国农业科学院;2001年
6 于威;人血小板因子4在家蚕细胞和幼虫体内的表达[D];浙江大学;2001年
7 吴大洋;家蚕滞育的生理学研究[D];西南农业大学;2002年
8 李关荣;家蚕sch系统胚胎期高温致死性的基因表达差异研究[D];西南农业大学;2002年
9 汪琳;外源基因在家蚕中靶向整合及线粒体载体研究[D];西南农业大学;2002年
10 SATEESH KUMAR;家蚕茧质性状DNA标记的分子生物学研究[D];浙江大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 唐顺明;蚕卵和氟中毒蚕体磷脂含量变化规律的研究[D];中国农业科学院;2000年
2 常平安;野桑蚕、蓖麻蚕的细胞遗传学分析及蚕的染色体FISH研究[D];西南农业大学;2001年
3 刘运强;家蚕线粒体基因组全序列测定及分析[D];西南农业大学;2001年
4 潘敏慧;家蚕病原性微孢子虫SCM_8的研究及Endoreticulatus bombycis SSUrRNA核酸序列的分析[D];西南农业大学;2001年
5 易发平;家蚕肠道好氧微生物菌群分析及微生态环境调控研究[D];西南农业大学;2001年
6 孙德斌;家蚕AFLP分子标记连锁图的构建[D];西南农业大学;2001年
7 魏兆军;蓖麻蚕线粒体DNA片段的克隆和序列分析[D];中国农业科学院;2001年
8 黄立华;褐飞虱、白背飞虱、灰飞虱mariner转座子的初步研究[D];南京农业大学;2001年
9 祁志军;0.2%苦皮藤素乳油环境安全性评价[D];西北农林科技大学;2001年
10 张袁松;BmDNV-5(信大株)的感染增殖及其基因组研究[D];西南农业大学;2001年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 汪敏华;家蚕吐出蜘蛛丝蚕茧发出绿荧光[N];解放日报;2000年
2 记者 汪敏华;实验室成果也可挂牌交易[N];解放日报;2000年
3 本报记者 任建华 杨益波 本期采访对象:宁波医药控股集团董事长、总经理 张耀洲;从“博导”到企业家[N];中国经济时报;2001年
4 如皋市蚕桑站 孙杰;家蚕传染病的防治[N];江苏科技报;2001年
5 张仕权 李亮;闲置蚕室养肉鸡[N];江苏科技报;2001年
6 许昌市农经委 毛明灿 郭喜中 俞建民;家蚕幼虫的开发利用[N];陕西科技报;2001年
7 郑青;揭开抗菌肽生物活性的面纱[N];医药经济报;2001年
8 本报记者 王瀛波;一位博导的多重“角色”[N];浙江日报;2001年
9 通讯员 王治奇 记者 夏桂廉;西南农大拥有家蚕基因序列世界第一[N];光明日报;2002年
10 本报记者汪敏华;风险资本———大胆走进实验室[N];解放日报;2002年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978