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NRP1调控M2型巨噬细胞极化介导电离辐射肺纤维化的作用研究

佘炜  魏江  董丹丹  赵原  顾露  
【摘要】:目的:研究神经菌毛蛋白1(Neurofibrin 1,NRP1)对电离辐射肺损伤导致纤维化进程的影响,并探讨其与M2型巨噬细胞之间的关系。方法:电离辐射肺纤维化(Radiation-induced pulmonary fibrosis,RIPF)组小鼠6Gy X射线全胸辐射建立电离辐射肺纤维模型;对照组即正常小鼠;EG00229给药组(EG00229为NRP1拮抗剂)小鼠辐射前7天小鼠EG00229给药处理。苏木精-伊红染色法 ( Hematoxylin-eosin staining,HE) 和天狼星红、马松染色观察三组小鼠肺组织损伤和纤维化胶原沉积;酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测三组小鼠肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-4(Interleukin-4,IL-4)、转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)炎性因子;免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测三组小鼠肺组织中Ⅰ型胶原(Collagen I,Col-Ⅰ)、α平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)和NRP1的蛋白表达水平;免疫荧光检测三组小鼠肺组织中CD14和M2型巨噬细胞极化标志物精氨酸酶1(Arginase 1,Arg1)、抵抗素样分子α(Resistin-like molecule alpha,FIZZ1)、几丁质酶3样蛋白1(Chitinase -3-like Protein 1,Ym1)蛋白表达水平。结果:HE染色显示IR组小鼠肺部呈现放射性肺纤维化病理形态表现,EG00229给药组小鼠肺组织纤维化损伤明显有所改善;与Con组比较,IR组小鼠肺组织中Col-Ⅰ、α-SMA 和NRP1以及TNF-α、IL-4、TGF-β1和CD14表达水平显著升高,EG00229显著抑制小鼠肺组织中Col-Ⅰ、α-SMA 和NRP1以及TNF-α、IL-4、TGF-β1和CD14表达水平(P0.05);与Con组比较,IR组小鼠肺组织中Arg1、FIZZ1 和Ym1表达水平显著升高,EG00229明显抑制小鼠肺组织中Arg1、FIZZ1 和Ym1表达水平。结论:NRP1可能通过调控M2型巨噬细胞极化促进电离辐射肺纤维化的发生发展。

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