我国原发性开角型青光眼患者TIGR基因突变筛选、克隆及序列分析

【摘要】：目的　研究我国原发性开角型青光眼 (primaryopenangleglaucoma,POAG)患者小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白 (trabecularmeshworkinducedglucocorticoidresponseprotein ,TIGR)基因的突变情况。方法　 (1)应用聚合酶链式反应 (polymerasechainreaction ,PCR)方法扩增 70例POAG患者、2 0例正常对照组的TIGR基因 3个外显子 (7对引物 )的各个片段 ,应用单链构像多态 (single strandedconformationpolymorphism ,SSCP)筛选可能突变的PCR产物。 (2 )将筛选出的样本 (PCR产物 ) ,克隆到PT Adv载体 ,以EcorI酶切鉴定重组质粒 ,然后用ABI 373自动测序仪行双向测序。结果　 (1)用SSCP方法筛选的 2例POAG患者在TIGR基因第 3外显子中部 (第 6对引物 )片段出现单链带型异常 ;正常对照组未见异常。 (2 )克隆测序的 2例样品 ,1例在 388密码子位置出现由GAT突变为AAT ,氨基酸由天冬氨酸替换为天冬酰胺 ,即Asp388Asn ;另 1例碱基序列无变化。提示我国POAG患者TIGR基因突变仅为 1 4% (1/ 70 ) ,远较国外为低。结论　我国POAG患者的发病机制可能与TIGR基因突变有关 ,但突变率较国外低 ,提示POAG发病存在地区或种族之间的差异。