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PCR技术快速检测常见缺失型α-地中海贫血-2基因

赵永忠  钟梅  刘忠英  徐湘民  
【摘要】:目的 建立一套设有内对照的稳定、可靠的检测缺失型 α-地中海贫血 - 2的 PCR技术 ,用于α-地中海贫血的分子诊断和人群筛查。方法 α-珠蛋白基因簇的高度同源性和高鸟嘌呤胞嘧啶核苷酸含量 ,使引物的选择和 PCR扩增受到限制。对于左缺失型 - α4.2基因 ,在疾病基因序列测定的基础上 ,设计了一套全新的三引物 PCR体系 ,用于区别正常和缺失等位基因。为检测右缺失型 -α3.7基因 ,则设计了四引物多重 PCR体系 ,除包含 1对能扩增 -α3.7基因特异片段的引物外 ,尚有 1对引物用于指示体系扩增成功与否。结果 建立了两种多重 PCR体系 ,在同一 PCR热循环参数下 ,可分别用于 - α4.2基因和 - α3.7基因的分子诊断 ,正常人只有 1条内对照扩增条带 ,而α-地中海贫血 - 2杂合子可见对应的 2条扩增条带。结论 该体系可检测 - α3.7和 - α4.2缺失型 α-地中海贫血 - 2基因 ,有望用于临床样本分子诊断和高发人群基因筛查。

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