健脾活骨方对糖皮质激素致血管内皮细胞功能损伤的干预作用

【摘要】：旨在观察健脾活骨方(JPHGF)对激素所致血管内皮细胞功能损伤的干预作用,并通过PI3K/Akt和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号轴探索其相关作用机制。实验采取离体和体外实验相结合的方法,先取正常SD大鼠胸主动脉环,用血管内皮细胞生长因子(VEGF,20μg·L-1)和/或甲泼尼龙琥珀酸钠(MPS,0.04 g·L-1)进行体外干预,然后加入JPHGF 8、16、32μg·L-1连续作用5 d,统计血管环芽处的微生血管数目、长度和面积;此外,以0.04 g·L-1MPS加入有20μg·L-1 VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),再加入JPHGF 8、16、32μg·L-1,分别进行迁移、侵袭及管腔形成实验,以观察HUVEC细胞的迁移、侵袭及管腔形成能力,利用蛋白免疫印迹法检测细胞中PI3K、p-Akt、p-ERK、p-JNK的蛋白表达量。结果显示,JPHGF能剂量依赖地改善由MPS诱导降低的大鼠胸主动脉环微血管数目、长度和面积,提高MPS诱导降低的HUVEC细胞迁移、侵袭和管腔形成能力,提高HUVEC中PI3K、p-Akt、p-JNK、p-ERK蛋白表达量。证明了JPHGF能通过激活PI3K/Akt和MAPK信号轴发挥对激素所致血管内皮细胞血管生成能力损伤的保护作用,为研究JPHGF治疗激素性股骨头坏死的机制提供合理的借鉴作用,为进一步丰富"健脾活血"治法科学内涵提供实验依据。