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金花茶有效部位抑制表皮生长因子受体(EGFR)抗非小细胞肺癌的作用机制研究

王梓灵  郭瑜婕  朱芸芸  陈乐  吴婷  刘大会  黄必胜  杜鸿志  
【摘要】:探究金花茶4个有效部位(金花茶叶总皂苷、金花茶叶总多酚、金花茶花总皂苷、金花茶花总多酚)抑制表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)抗非细小细胞肺癌细胞增殖和迁移作用及其分子作用机制。采用MTT实验检测金花茶4个有效部位对非小细胞肺癌NCI-H1975与HCC827细胞活力的影响;通过细胞划痕实验与Transwell小室迁移实验考察金花茶4个有效部位给药后对非小细胞肺癌细胞迁移能力的影响;基于酶活检测,测定金花茶4个有效部位对EGFR酶活性的影响;采用药物分子对接实验,探究金花茶有效部位代表性成分与EGFR蛋白的直接作用能力与作用位点;利用Wes-tern blot检测金花茶4个有效部位对EGFR下游信号通路相关蛋白的表达水平的影响。结果发现金花茶4个有效部位在50、100、150、200μg·mL~(-1)均能显著性抑制人非小细胞肺癌NCI-H1975与HCC827细胞的活力并呈时间与浓度依赖性;划痕实验与Transwell小室迁移实验显示金花茶4个有效部位作用于NCI-H1975与HCC827细胞均能显著性抑制非小细胞肺癌细胞的迁移能力;蛋白激酶活力测定实验结果表明,EGFR的酶活被金花茶4个有效部位显著性抑制;分子对接实验结果证实,金花茶4个有效部位化合物中多种药效成分与EGFR酶有较强的结合作用;Western blot实验结果确证,金花茶4个有效部位能下调非小细胞肺癌细胞EGFR及其下游信号通路蛋白表达水平。结果表明,金花茶4个有效部位均能抑制非小细胞肺癌,且其作用机制可能与EGFR及其下游信号通路相关。该研究为金花茶有效成分治疗非小细胞肺癌提供科学依据,对金花茶抗肿瘤作用机制的深入研究具有一定的参考意义。

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