收藏本站
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

土壤磷素高效利用转基因大豆特异性PCR检测方法

姚涓  潘志文  陈伟庭  周峰  穆虹  姜大刚  梅曼彤  
【摘要】:华南农业大学根系生物学研究中心采用拟南芥的紫色酸性磷酸酶基因AtPAP15转化大豆品系粤春03-3(YC03-3),获得了酸性磷酸酶活性明显提高、可高效利用土壤磷素的转基因大豆新品系AP15-1。本研究以AP15-1为研究对象,应用TAIL-PCR技术,根据载体序列设计特异引物,获得了转化载体左侧插入的旁邻序列。设计事件特异性检测引物,进行PCR扩增,只能在AP15-1的样品中扩增出特异性条带,进一步用实时荧光定量PCR作分析,结果显示,该引物对重复性好,融解曲线显示只有一个特异峰值。本实验应用该引物对建立的检测方法,检测的灵敏度可以达到0.01%,实时荧光定量PCR检测的极限值可以达到9个基因组的拷贝数,能够满足对转基因大豆新品系AP15-1及其衍生品种检测的需要。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前16条
1 姚涓;潘志文;陈伟庭;周峰;穆虹;姜大刚;梅曼彤;;土壤磷素高效利用转基因大豆特异性PCR检测方法[J];中国油料作物学报;2012年02期
2 钱翔宇;柳毅;顾守进;苏旭东;马晓燕;张伟;;PCR检测转基因大豆[J];安徽农业科学;2009年29期
3 徐吉东;;实时荧光定量PCR技术在水稻氮素基因表达中的应用之我见[J];农业开发与装备;2017年07期
4 肖乃衍;林冰;刘迪;陈平华;许跃语;施桂姣;王恒波;郭晋隆;高三基;许莉萍;陈如凯;;甘蔗内标基因PCR检测技术研究[J];热带作物学报;2017年03期
5 王庆平;王成;兰青阔;陈锐;赵新;沈晓玲;王永;檀建新;;芝麻物种特异性定性PCR方法的建立[J];天津农业科学;2017年05期
6 马鑫;谭松林;邢虎成;廖少波;;苎麻实时定量PCR体系的建立[J];中国麻业科学;2017年03期
7 王国莉;丘裕雄;范红英;;转基因玉米实验室PCR检测体系的优化及应用[J];基因组学与应用生物学;2015年08期
8 赵丹;周涛;袁媛;肖承鸿;江维克;康传志;;基于特异性PCR和荧光检测技术快速鉴定艾纳香[J];植物研究;2015年06期
9 梁利霞;宛煜嵩;金芜军;;利用复合PCR方法同时检测三种转基因水稻[J];基因组学与应用生物学;2014年01期
10 袁磊;赵蕾;孙红炜;颜世磊;路兴波;;转基因玉米的定性PCR检测[J];山东农业科学;2009年11期
11 武海斌;孙红炜;李宝笃;杨崇良;路兴波;;转基因玉米多重PCR-基因芯片联用的检测方法[J];农业生物技术学报;2009年06期
12 胡汉桥;李信申;邢姗姗;何红;;抗草甘膦转基因大豆PCR检测及问题探讨[J];生物技术通报;2007年01期
13 颜泽洪;代寿芬;刘登才;魏育明;郑有良;;应用SDS-PAGE分析和PCR鉴定长发带芒草的高分子量谷蛋白亚基[J];云南植物研究;2005年06期
14 吕山花,常汝镇,陶波,李向华,栾凤侠,郭珊花,邱丽娟;抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的建立与应用[J];中国农业科学;2003年08期
15 敬思群;于红;郭改;涂亦娴;普燕;;油莎草实时荧光定量PCR内参基因的选择[J];新疆大学学报(自然科学版);2016年03期
16 涂冬萍;莫长明;马小军;赵欢;唐其;黄杰;潘丽梅;韦荣昌;;罗汉果实时荧光定量PCR内参基因的选择[J];中国中药杂志;2015年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈宇;方和娣;王政;谭小力;;油菜在不同胁迫条件下应用于实时荧光定量PCR标准化的候选内参基因的评估[A];2013全国植物生物学大会论文集[C];2013年
2 万雪秋;杨足君;冯娟;刘悦;任正隆;;黑麦染色体组特异PCR标记的建立[A];2005年全国作物遗传育种学术研讨会暨中国作物学会分子育种分会成立大会论文集(一)[C];2005年
3 赵丽萍;陈亮;王新超;姚明哲;;茶树新梢不同叶片中β-葡萄糖苷酶和β-樱草糖苷酶基因表达的实时定量PCR分析[A];长三角现代植物生物学与农业专题论坛论文集[C];2005年
4 武泰存;王景安;;基于PCR和SDS-PAGE方法的转基因大豆检测[A];中国植物生理学会第九次全国会议论文摘要汇编[C];2004年
5 赵明明;郭顺星;;铁皮石斛种子接菌共生萌发SSH文库的构建及荧光定量PCR对库中5个转录产物的验证[A];第十三届中国科协年会生物医药博士论坛论文集[C];2011年
6 张晓科;魏益民;李小军;;PCR法快速检测小麦分离早代的优质HMW-GSDx5基因[A];全国作物细胞工程与分子技术育种学术研讨会论文集[C];2003年
7 吴凯朝;李杨瑞;杨丽涛;吴建明;;甘蔗cDNA-SCoT差异显示分析PCR反应体系建立、优化及应用[A];中国作物学会2013年学术年会论文摘要集[C];2013年
8 陈涛;张善磊;王建;张亚东;朱镇;赵庆勇;赵凌;周丽慧;姚姝;赵春芳;王才林;;水稻抗咪唑啉酮类除草剂基因PCR分子标记的开发[A];全国农业生物化学与分子生物学第十五届学术研讨会会议文集[C];2016年
9 杨杰;曹卿;王军;范方军;陈涛;张玉琼;王才林;仲维功;;利用等位基因特异PCR开发水稻暗胚乳基因Wx-mq的功能标记[A];江苏省遗传学会第八届会员代表大会暨学术研讨会论文集[C];2010年
10 朱昌兰;贺浩华;贺晓鹏;彭小松;陈小荣;傅军如;欧阳林娟;边建民;胡丽芳;;利用等位基因特异性PCR检测水稻可溶性淀粉合酶SSⅢa基因的单核苷酸多态性[A];中国作物学会50周年庆祝会暨2011年学术年会论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 苏长青;适合转基因抗虫水稻和棉花PCR检测标准质粒的构建及试用[D];中国农业科学院;2011年
2 薛树林;小麦高密度PCR分子标记遗传图谱的构建及抗赤霉病QTL近等基因系的选育[D];南京农业大学;2007年
3 任跃英;黄果、红果人参和西洋参种源的系统研究与鉴定[D];吉林农业大学;2002年
4 郭志富;类大麦属物种种子贮藏蛋白基因的分子克隆[D];四川农业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 沈苏南;一种多重PCR技术在转基因大豆检测中的应用研究[D];苏州大学;2016年
2 汪秀秀;基于锁核酸技术转基因棉花多重PCR定量检测方法的研究以及标准分子的研制和验证[D];华东理工大学;2014年
3 马丽华;应用5’锚定PCR开发谷子微卫星标记[D];河北师范大学;2008年
4 刘石泉;霍山石斛遗传稳定性RAPD研究及位点特异性PCR鉴别[D];上海师范大学;2005年
5 马文良;用于转基因玉米品系检测的PCR芯片的应用研究[D];北京工业大学;2017年
6 何宁;小麦多目标性状分子标记的PCR检测体系的建立[D];河南农业大学;2007年
7 万雪秋;黑麦染色体组特异PCR标记的建立及其小麦—非洲黑麦1RS/2BL染色体新易位系的获得[D];电子科技大学;2006年
8 林冰;甘蔗内源低拷贝基因的筛选鉴定与PCR检测技术研究[D];福建农林大学;2013年
9 吕山花;抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的建立与应用[D];东北农业大学;2002年
10 刘东;转基因棉籽及其食用油脂多重PCR检测的研究[D];河北科技大学;2012年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978