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内毒素对野生型小鼠心肌细胞钙信号和t小管结构的影响

陈蓉  钱程  刘强  朱彦琪  杨文艺  李晓宇  洪江  
【摘要】:目的研究内毒素(脂多糖,LPS)对野生型小鼠心肌细胞钙火花和钙瞬变以及t小管结构的作用,探讨内毒素致心脏损害的可能机制。方法 C57BL/6雄性小鼠,分离心脏后Langendorff灌流法获取心室肌细胞。Fluo-4/AM钙荧光指示剂负载细胞,应用激光共聚焦显微镜成像技术记录10μg/ml LPS灌流30 min前后心肌细胞的钙信号(钙火花和钙瞬变)变化,测定钙火花幅度、空间大小、时程、频率变化以及钙瞬变幅度、达峰时间和衰减时间。同法分离心室肌细胞做细胞培养,给药组给予10μg/ml LPS,对照组给予灭菌注射用水,24及48 h取培养细胞,Di-8ANEPPS膜荧光指示剂负载细胞,应用激光共聚焦显微镜成像技术记录心肌细胞t小管结构变化。结果 LPS灌流可明显增加钙火花频率(0.68±0.1 vs 0.20±0.04 events/100μm/s,P0.001),对钙瞬变无明显影响。给药组48h后较对照组t小管结构有轻微破坏(1.47±0.04 vs 1.60±0.05,P=0.04)。结论内毒素可引起小鼠心室肌细胞钙火花频率增大,后期t-小管结构破坏。

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