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检测肠炎沙门氏菌ELISA方法的建立与应用研究

黄素珍  杜元钊  张艳红  
【摘要】:从已建立的抗沙门氏菌单抗中筛选出适用于肠炎沙门氏菌ELISA检验的3-47-26单抗,采用筛选强阳性杂交瘤细胞株制备了高效价的3-47-26单抗。改进用辣根过氧化物酶标记高效价单抗的方法,进行了HRP标记单抗的免疫生物学特性的鉴定。确定了包被浓度和酶标抗体的工作浓度:HRP-3-47-26为1∶100;LPS的包被浓度为400ng/mL。试验中采用LPS与多聚赖氨酸的结合,解决了包被过程中的解吸附作用,增强了包被的稳定性,同时也减少了假阳性反应,优化了包被过程。建立了检测肠炎沙门氏菌的抗原竞争ELISA方法,利用样品中的LPS抑制酶标抗体与包被的LPS结合,以降低底物反应的颜色从而达到检测的目

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