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鱼藤酮处理人神经母细胞瘤细胞的氧化水平研究

张萍  
【摘要】:目的 探讨鱼藤酮干预人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)后细胞内氧化物和抗氧化物的表达水平。方法 常规胎牛血清培养2 d后,根据不同细胞处理方式将细胞分为正常组和鱼藤酮组,其中鱼藤酮组按照浓度梯度分亚组为25、50、100、200、500、1000、2000 nM(nM:nmol/L)。分别使用光镜观察上述不同鱼藤酮干预浓度梯度细胞形态学变化以及MTT比色法检测细胞存活和生长,从而探讨最佳鱼藤酮干预浓度。使用流式细胞仪观察鱼藤酮干预后的细胞内氧化水平DCFH-DA变化;采用酶联免疫吸附法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性水平以及细胞内氧化物质脂质过氧化水平。结果 MTT检测和光镜检测显示,SH-SY5Y细胞活力与鱼藤酮的干预浓度呈浓度依赖性,诱发细胞氧化应激损伤而不过度造成细胞死亡的浓度为500 nM的鱼藤酮,而2000 nM的鱼藤酮加入培养基后细胞几乎停止生长。流式细胞术和酶联免疫吸附法检测使用500 nM鱼藤酮处理后的DCFH-DA染色SH-SY5Y细胞内的氧化应激水平增高,抗氧化物SOD活性水平减少,氧化物脂质过氧化产物(TBARS)增多。结论鱼藤酮促进SH-SY5Y细胞内抗氧化物SOD活性水平减少,氧化物脂质过氧化产物增多,氧化应激水平增高。SH-SY5Y细胞活力与鱼藤酮的干预浓度呈浓度依赖性,浓度越高细胞死亡越多。

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