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姜黄素通过抑制α-突出核蛋白聚集保护鱼藤酮致多巴胺能细胞损伤的机制研究

崔群力  孙圣刚  
【摘要】:目的探讨姜黄素(Curcumin)对α-突触核蛋白(α-synuclein)聚集的影响,及其拮抗鱼藤酮(Ro)诱导的PC12细胞损伤的作用机制。方法选用大鼠嗜铬细胞瘤株PC12细胞,利用鱼藤酮诱导其损伤建立帕金森病细胞模型,利用姜黄素进行干预;采用MTT法检测细胞活力、荧光酶标仪检测蛋白酶体水解酶活性、Western blotting法检测α-突出核蛋白表达、免疫荧光法检测细胞内α-突出核蛋白聚集、流式细胞仪检测PC12细胞凋亡。结果鱼藤酮组PC12细胞活力及蛋白酶体水解酶活性明显降低,α-突出核蛋白表达和聚集以及细胞凋亡率明显增加;经0.5、1.0、5.0、10μmol/L各浓度姜黄素预处理4h后与0.1μmol/L鱼藤酮共同孵育PC12细胞24h,0.5和1.0μmol/L的姜黄素使细胞活力以及蛋白酶体水解酶活性明显升高、α-突出核蛋白的表达和聚集明显减少、细胞凋亡率明显降低;5.0和10μmol/L姜黄素对鱼藤酮的拮抗作用明显减弱,细胞活力和蛋白酶体水解酶活性、以及细胞凋亡率与鱼藤酮组比较均无明显差异。结论低浓度姜黄素能够通过诱导PC12细胞蛋白酶体水解酶活性、抑制α-突出核蛋白的表达和聚集,从而拮抗鱼藤酮诱导的PC12细胞的损伤。

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