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附子多糖纯化工艺的优化及其毒性

丁兴杰  蒲忠慧  熊亮  郭力  刘菲  彭成  
【摘要】:目的优化附子多糖纯化工艺,并评价其毒性。方法在单因素试验基础上,以透析温度、透析时间、换液次数为影响因素,多糖纯度为评价指标,Box-Behnken响应面法优化纯化工艺。然后,以受精后48 h发育正常的斑马鱼胚胎作为心脏毒性模型,分别用0、6.25、12.5、25、50、100μg/mL多糖处理,每12 h观察胚胎心脏形态、心率变化,直至96 h;以受精后10 h发育正常的斑马鱼胚胎作为心脏毒性模型,分别用0、6.25、12.5、25、50、100μg/mL多糖处理,每12 h观察胚胎死亡率、畸形率,直至48 h。结果最佳条件为醇沉体积分数80%,Sevage法除蛋白后于36℃下透析6次,每次31 h,多糖纯度91.89%。不同质量浓度多糖给药后,斑马鱼心率、胚胎死亡率无明显变化。结论该方法简便可行、稳定可靠、预测性好,可用于纯化对斑马鱼无明显心脏、胚胎毒性的附子多糖。

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