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玻璃化法超低温保存柑桔茎尖及植株再生

王子成  邓秀新  
【摘要】:采用玻璃化法对柑桔茎尖的离体超低温保存进行了研究。约 10mm长的柑桔茎尖于含 5 %二甲基亚砜 (DMSO)的培养基上预培养 3d ,切取 2~ 2 .5mm长的茎尖 ,室温下6 0 %玻璃化溶液 2 (PVS2 )装载 2 0~ 30min ,然后用PVS2 于 0℃处理 5 0~ 6 0min ,换入新鲜的PVS2 ,迅速投入液氮中 ,2 4h后在 4 0℃水浴中迅速化冻 ,再用 1.2mol/L蔗糖培养基洗涤 2次 ,接种于含BA 1.0mg/L的MT培养基上 ,2 6℃暗培养 1周后转于正常光下培养。枳壳茎尖超低温保存后用氯化三苯基四氮唑 (TTC)法检测 ,成活率为 10 0 % ,培养再生率达到 90 % ,再生后的苗能正常生根 ,与对照没有形态上的变异 ,移栽可成活

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