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GPC3启动子报告基因载体构建与转录活性分析

金荣华  陈曦  王美霞  张洪海  孙玉  陈德喜  
【摘要】:目的构建磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)启动子荧光素酶报告基因载体,并验证其转录活性。方法以人类基因组DNA为模板,PCR扩增GPC3启动子基因片段,克隆到pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体上,通过转染HepG2细胞检测荧光素酶活性来验证GPC3启动子的转录活性。结果 GPC3基本启动子和全长启动子分别成功构建到pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体中,GPC3基本启动子具有很强的转录活性,而全长启动子的转录活性比基本启动子高4倍以上。结论成功构建了GPC3启动子荧光素酶报告基因载体,为研究GPC3转录调控提供了重要手段。

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