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黄芩汤调控Nrf2通路对溃疡性结肠炎大鼠氧化应激作用的影响

马旭冉  王彦礼  邹迪新  刘佳星  宋红新  杨伟鹏  李彧  
【摘要】:研究黄芩汤对溃疡性结肠炎大鼠的氧化应激作用的影响,探讨其抗氧化作用机制。经中国中医科学院中药研究所伦理委员会审议同意后,运用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic, TNBS)联合乙醇造模法建立大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)模型,将SD大鼠按体重随机分为正常组、模型组、柳氮磺砒啶组(salazosulfapyridine, SASP, 0.5 g·kg~(-1))、黄芩汤高、中、低剂量组(20、10、5 g·kg~(-1))。连续给药5天后,取血清以及结肠组织,生化法检测大鼠血清中过氧化氢酶(catalase, CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-px)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的活性, ELISA法测定大鼠血清中过氧化脂(lipid peroxide, LPO)的浓度,免疫组织化学法观察核因子E_2相关因子Nrf2 (nuclear factor erythroid-2-related factor 2)的阳性表达,利用Western blot技术检测Nrf2下游抗氧化酶血红素氧化酶1 (heme oxygenase, HO-1)、醌氧化还原酶1 (NAD[P]H:quinone oxidoreductase 1, NQO-1)的蛋白表达。与正常组相比,模型组血清SOD、CAT、GSH-px活性均有显著性下降,而模型组血清MPO活性有显著性增加(P0.05或P0.01),与模型组相比,黄芩汤高、中剂量组中CAT的活性增加有显著性差异(P0.05或P0.01),黄芩汤高、中、低剂量组中GSH-px活性均显著增加(P0.05);与正常组相比,模型组血清中LPO的含量显著升高(P0.01),而与模型组相比,黄芩汤高、中剂量组均能显著降低LPO的含量(P0.05);免疫组化检测发现,阳性药柳氮磺胺吡啶组与黄芩汤高剂量组Nrf2表达有统计学意义(P0.05); Western blot结果显示,与模型组相比,黄芩汤各给药组与柳氮磺胺吡啶组均能够增加组织内HO-1和NQO1的表达,并且呈现一定的剂量依赖关系。黄芩汤具有显著的抗氧化应激作用,能明显改善UC大鼠的体征、精神状况及排便情况,其对于UC的治疗作用机制可能与激活Nrf2通路,增加HO-1、NQO-1等Ⅱ相代谢酶的表达,降低血清中LPO、MPO的含量,增强SOD、CAT、GSH-px的活性有关。

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