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栀子苷介导GLP-1R/Akt信号通路改善大鼠脑缺血再灌注损伤和神经元凋亡的研究

谭慧敏  周亮  邹慧禅  
【摘要】:目的 观察栀子苷对脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型大鼠的神经保护作用及对胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法 50只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,栀子苷低、高剂量组及尼莫地平片组,每组10只。采用线栓法制备CIRI大鼠模型,缺血2 h再灌注24 h后,栀子苷低、高剂量组大鼠分别ig给予10、40 mg·kg-1的栀子苷,尼莫地平片组大鼠ig给予8.1 mg·kg-1尼莫地平,假手术组和模型组大鼠ig等体积生理盐水,每天1次,连续7 d。造模后及给药结束后,分别对各组大鼠进行神经功能缺损评分;给药结束后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)水平,苏木素-伊红(HE)染色检测脑组织病理学变化,尼氏染色检测神经元与尼氏小体变化,免疫组化染色检测脑组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2关联X蛋白(Bax)表达,蛋白质印迹法(Western blotting)检测脑组织细胞色素C(Cyt-C)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)、胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分显著升高(P0.05),血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著升高(P0.05);皮质细胞间质疏松、增宽,有大量神经元细胞质萎缩和细胞核损伤;脑神经元皱缩,尼氏小体变小,数目明显减少。大鼠脑组织Bcl-2表达显著降低(P0.05),Bax表达显著升高(P0.05);脑组织中Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平显著升高(P0.05),GLP-1R和p-Akt蛋白表达水平显著降低(P0.05)。与模型组比较,栀子苷高剂量组和尼莫地平片组大鼠神经功能缺损评分均显著降低(P0.05),血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低(P0.05),皮质细胞较为整齐,神经元细胞和尼氏小体损伤减小,Bcl-2表达显著升高(P0.05),Bax表达显著降低(P0.05),同时,Cyt-C、Caspase-3及Caspase-9蛋白表达水平显著下降(P0.05),GLP-1R和p-Akt蛋白表达水平显著升高(P0.05)。结论 栀子苷能够改善大鼠CIRI,减少神经元凋亡,其作用机制可能与激活GLP-1R/Akt信号通路有关。

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