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基于LC-MS/MS的肾康注射液在正常和肾衰大鼠体内药动学差异研究

李廷昱  史鹏  侍晓萍  孙鹏远  
【摘要】:目的研究肾康注射液在正常和慢性肾衰大鼠体内的药动学,为肾康注射液的临床安全合理用药提供科学参考。方法选择黄芪甲苷和大黄酸作为肾康注射液的药动学标记物,建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法检测其血药浓度,并进行专属性、精密度、准确度、回收率、基质效应、稳定性考察;采用连续21 d ig腺嘌呤(250 mg/kg)诱导大鼠慢性肾衰模型,观察并记录两组大鼠的体质量、肾质量、尿量;全自动生化仪检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,观察肾脏外观并进行组织切片HE染色处理。正常和慢性肾衰大鼠静脉滴注肾康注射液(2 mL/kg),采用LC-MS/MS法测定大鼠血浆中黄芪甲苷和大黄酸的血药浓度。结果 LC-MS/MS法采用Hypersil BDS-C_(18)(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.1%甲酸水(8∶2);体积流量0.8 mL/min;柱温30℃;进样量为10μL;电喷雾离子源(ESI),负离子扫描检测方式,动态多反应监测模式(MRM)。方法学验证结果表明,LC-MS/MS测定方法快速、灵敏、特异。ig腺嘌呤21 d后,与对照组比较,造模组肾脏肥大,颜色苍白,造模组组织切片的肾小体数量减少、肾小球囊腔增大、肾小管内有棕色的腺嘌呤沉积。与对照组比较,从造模10 d起慢性肾衰大鼠的体质量显著减轻(P0.05);造模结束后,肾质量显著增加、24 h尿量显著增加、血清肌酐和尿素氮水平显著升高(P0.05),慢性肾衰大鼠模型成功建立。大鼠药动学实验结果发现,与对照组比较,慢性肾衰大鼠体内黄芪甲苷的药时曲线下面积(AUC0-t)和最大血药浓度(C_(max))分别下降了28.6%和21.6%,黄芪甲苷和大黄酸的清除半衰期(t_(1/2z))分别缩短了23.5%和43.7%,均具有统计学差异(P0.05)。结论慢性肾衰大鼠对肾康注射液的清除加快,药物作用时间缩短。

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