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葡萄籽提取物与柳氮磺吡啶联合用药对实验性溃疡性结肠炎的作用

全帅  吕开原  赵艳敏  孙华庚  胡骁  刘丹  刘岱琳  
【摘要】:目的研究葡萄籽提取物(GSPE)与柳氮磺吡啶(SASP)联合用药治疗葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎的效果及作用机制。方法将SPF级C57小鼠随机分为对照组、模型组、GSPE(250 mg/kg)组、SASP(250 mg/kg)组、联合用药(SASP 250 mg/kg+SASP 250 mg/kg)组,对照组给予正常饮用水,其他组均自由饮用3%DSS水溶液,连续饮用7 d,诱发小鼠溃疡性结肠炎模型;造模第1天同步开始ig给药,每天记录小鼠体质量、便血、便型等症状变化;7 d后断头取血,收集结肠和脾脏,记录结肠长度、脾脏质量变化情况。HE染色评估小鼠结肠黏膜组织病理变化,ELISA法检测血清和结肠组织中炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和NO的表达变化以及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)细胞因子的含量变化,免疫组化分析结肠组织上皮细胞中NF-κB-p65、Nrf2、HO-1和Keap-1含量的变化。应用金氏Q值法分析联合用药的作用效果。结果与模型组比较,各给药组的小鼠体质量下降幅度显著降低(P0.01),小鼠腹泻、便血症状改善明显,其中联合用药组小鼠体质量较单独给药组下降更缓,小鼠腹泻、便血程度改善更明显(P0.05)。各给药组小鼠血清及结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NO、MDA含量较模型组显著降低,SOD含量则显著升高(P0.01);病理组织切片分析发现,各给药组小鼠结肠黏膜病理损伤较模型组显著减轻,其中联合用药组小鼠结肠黏膜病理损伤较单独给药组降低更为显著(P0.05)。免疫组化分析结果也显示,各给药组小鼠的NF-κB-p65、Keap-1蛋白表达与模型组比较显著下调(P0.01),Nrf2、HO-1蛋白表达显著上调(P0.01)。联合给药组与单独给药组比较,NF-κB-p65、Keap-1蛋白表达显著降低(P0.05),Nrf2、HO-1蛋白表达显著升高(P0.05)。金氏Q值法评价两药合用后对IL-1β、IL-6、TNF-α、NO、MDA、NF-κB-p65、Keap-1的作用效果均大于1.15,说明GSPE与SASP具有协同作用。结论 GSPE与SASP联合用药治疗实验性溃疡性结肠炎效果优于单独给药,联合用药增强GSPE和SASP的抗氧化和抗炎作用,GSPE与SASP配伍治疗溃疡性结肠炎可进一步发挥协同增效的作用。

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