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PIK3CA基因功能性点突变细胞系的构建和鉴定

郭晓娜  李劲风  胡宗风  朱伟  李小鹏  
【摘要】:为揭示人乳头瘤病毒(Human papillomavirus, HPV)阳性及阴性头颈癌中PIK3CA突变的致癌分子机制,研发针对PIK3CA突变癌症的靶向药物。通过CRISPR/Cas9系统介导的同源重组机制获得HPV16阳性和阴性人永生化角质形成细胞PIK3CA H1047R功能性点突变细胞系,对该点突变细胞系的研究表明,PIK3CA H1047R突变细胞系已构建完成。Western Blot结果表明,基因编辑后的细胞系能够正常表达PIK3CA编码蛋白;RT-PCR测序结果显示,点突变基因能够正常表达;同时,相比于永生化不成瘤细胞,突变后的细胞具有成瘤性并且增殖速度明显加快。功能性点突变细胞系的获得,为进一步揭示PIK3CA突变的致癌分子机制,研发针对PIK3CA突变肿瘤的靶向药物提供理论基础。

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