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新生大鼠海马脑片培养方法

王勇  朱小南  陈汝筑  何进  余剑平  汪雪兰  
【摘要】:目的 建立新生大鼠海马脑片体外长期培养方法。方法 取出生后 10d的新生大鼠海马 ,切成30 0 μm厚的脑片 ,转至带有微孔膜插件的培养皿中进行培养。培养期间进行形态学观察 ,并通过MTT法鉴定组织活力 ,免疫组化法观察胶质细胞对损伤的反应 ,电生理反应以检测神经细胞功能。结果培养海马脑片逐渐变薄 ,5d后结构清晰 ,细胞形态完整 ;MTT法显示培养 4 0d内的海马组织均能保持高摄入MTT能力 ;在Schaffer侧枝给予单脉冲刺激 ,于CA1区能接收到完整的群峰电位 ;谷氨酸导致胶质细胞抗胶质纤维酸性蛋白高表达。结论 本方法培养 4 0d的海马脑片具有正常的活力和功能。

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