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DC-SIGN的配体对肺结核患者树突状细胞黏附BCG水平的影响

马素忍  郭述良  罗永艾  
【摘要】:目的探讨DC-SIGN的配体脂阿拉伯甘露聚糖(ManLAM)对肺结核患者树突状细胞黏附BCG水平的影响。方法构建带有EGFP基因的分枝杆菌穿梭质粒,电转化BCG,热诱导绿色荧光蛋白的表达,从而标记BCG;分离结核患者外周血单个核细胞,以GM-CSF和IL-4诱导树突状细胞生长,培养第5天用流式细胞术检测其表面DC-SIGN表达率,并在与不同浓度ManLAM预孵育后,与标记BCG结合,测定两者的黏附率。结果(1)分枝杆菌穿梭质粒构建成功,命名为pHSP70-EGFP。(2)用绿色荧光蛋白标记BCG成功。(3)肺结核患者外周血树突状细胞表面DC-SIGN表达率为(86.69±3.66)%。(4)伴随着ManLAM浓度的不断增加,肺结核患者外周血树突状细胞和BCG的黏附率不断下降。结论(1)可以用穿梭质粒pHSP70-EGFP在BCG中表达绿色荧光蛋白,从而标记BCG。(2)DC-SIGN分子是肺结核患者外周血树突状细胞表面结核分枝杆菌的重要受体。(3)纯化的ManLAM可以阻断肺结核患者外周血树突状细胞与BCG的黏附。

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