慢病毒载体上调GADD45α增强伊马替尼耐药株K562IR细胞的药物敏感性
【摘要】：目的探讨通过慢病毒载体上调GADD45α基因对伊马替尼(IM)耐药株K562IR细胞的增殖、迁移及凋亡的影响。方法培养K562细胞及伊马替尼耐药细胞K562IR,采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和Western blot法检测K562和K562IR细胞中GADD45αmRNA和蛋白的表达水平;采用过表达GADD45α的慢病毒载体及对照载体转染于K562IR细胞中,分别为Lv-GADD45α和Lv-NC,通过Western blot检测上调后各组细胞GADD45α蛋白表达水平,并进一步用CCK-8法、Tanswell法和Annexin V-FITC/PI双染法检测转染后细胞增殖、迁移和凋亡的变化。结果 K562IR细胞中的GADD45α蛋白和mRNA表达水平低于K562细胞,GADD45α基因转染后,Lv-GADD45α组细胞中的GADD45α蛋白表达水平高于Lv-NC组。Lv-GADD45α组细胞在伊马替尼处理后,IC_(50)值低于Lv-NC组,凋亡率高于Lv-NC组,同时细胞迁移能力也下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论通过上调伊马替尼耐药株K562IR细胞中GADD45α基因,可以增强慢性髓系白血病细胞K562IR对于伊马替尼的敏感性,抑制白血病细胞的增殖、促进其凋亡。
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