瑞替普酶融合蛋白的表达、纯化及分子伴侣对其复性的影响

【摘要】：目的构建瑞替普酶(r-PA)融合蛋白的原核表达体系,并研究DsbA、DsbC、pKJE7、pGro7、pTf16等分子伴侣对其复性的影响。方法将r-PA基因克隆到表达载体质粒PET-32a中,通过异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,在宿主菌E.coli BL21中进行表达。在复性时分别添加不同分子伴侣,研究不同分子伴侣对融合蛋白体外复性的影响。结果SDS-PAGE和Western blot结果表明r-PA融合蛋白正确表达,分子伴侣DsbA、pKJE7、pTf16对融合蛋白的复性有明显效果,体外溶圈实验表明复性后的r-PA具有纤溶活性。结论分子伴侣能有效帮助r-PA融合蛋白的复性。

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2	丁鸣,余建法,丁仁瑞;融合表达载体的研究进展[J];生物技术;1998年04期
3	张学述,简志愚,刘裕,谢茂超,黄林,肖洁,周秀彬,栗克喜;表达含凝血酶识别位点的rhGM-CSF融合蛋白工程菌的选定及其酶切后目的蛋白的纯化[J];中国生物制品学杂志;1999年02期
4	李晨阳,齐义鹏,路江涛,姜纳新,王云龙,郝宗宇;HEV嵌合抗原的克隆表达及在抗-HEV ELISA试剂中的应用[J];武汉大学学报(理学版);2002年02期
5	潘玉先,廖志勇,郝卫,车小燕;氯霉素乙酰基转移酶融合蛋白表达、纯化和鉴定[J];免疫学杂志;2004年S1期
6	何贤辉,徐丽慧,刘毅,蔡小嫦,曾耀英;SARS-CoV Sars7a和EGFP融合蛋白真核表达载体构建及其表达[J];中国病毒学;2004年03期
7	张合喜,程晋鹏,王友洁,郝巧玲;Ephrin-A1、Ephrin-B1融合蛋白的构建、表达和活性测定[J];华中科技大学学报(医学版);2005年03期
8	黄世容,孟小林,徐进平,鲁伟,王健;HrpN基因在毕赤酵母中的克隆表达与活性检测[J];武汉植物学研究;2005年04期
9	娄培安;章辉;李玲;刘加彬;王晓婷;周艳秋;赵广法;朱荫昌;;重组结核杆菌分泌融合蛋白活性鉴定及应用[J];中国公共卫生;2006年05期
10	丁兆忠;苗向阳;孙世铎;;抗菌肽Cecropin P1基因表达载体构建与表达[J];黑龙江畜牧兽医;2006年06期
11	马卫列;刘芳;何承伟;;用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素的方法研究[J];第三军医大学学报;2006年14期
12	李妍;邵阳光;李丰;;人PAK4基因原核表达载体的构建及其重组蛋白表达[J];解剖科学进展;2006年04期
13	李莉;高秀来;宋一志;陆涛;景鹏;;融合蛋白表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达[J];首都医科大学学报;2006年06期
14	王臻;颜江华;王阶平;谢莲英;吴娜;;凝血靶向通用效应因子tTF/SA融合蛋白的表达及活性鉴定[J];生物工程学报;2007年02期
15	吴亚敏;邓莉;彭礼飞;杨陈;胡晶晶;付汉维;;Trx-NAP 5融合蛋白在大肠杆菌中的表达及其活性检测[J];生物技术;2007年01期
16	许静;刁世勇;张磊;徐洁;孟磊;;原核表达载体pOPE101-8E5的改构及单链抗体的表达鉴定[J];中国生物工程杂志;2007年04期
17	彭礼飞;邓莉;杨陈;吴亚敏;鲁澄宇;胡晶晶;;线虫抗凝血蛋白c2的融合表达及其抗凝活性分析[J];生物技术通讯;2007年04期
18	陈庆梅;吴国君;吴洁;李泰明;曹荣月;刘景晶;;热休克蛋白65及其融合蛋白Hsp65-6×P277的分离纯化和稳定性研究(英文)[J];药物生物技术;2007年04期
19	唐金宝;宋淑亮;吉爱国;朱鹏;;葡萄球菌蛋白A“ZZ”与EGFP的融合表达及活性测定[J];中华微生物学和免疫学杂志;2007年06期
20	黄明;韦剑;周飞燕;;人源胸腺素α原和白介素2融合蛋白的基因克隆与原核表达[J];广东药学院学报;2008年03期

中国重要会议论文全文数据库

前10条

1	王玉梅;刘畅;蒙冲;郭风云;;HEV ORF_2重组菌菌种的稳定性及融合蛋白的应用[A];新世纪新机遇新挑战——知识创新和高新技术产业发展（上册）[C];2001年
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3	毛华;陈松森;狄旭;贾佩臣;梁植权;;重组人SCF-GM-CSF融合蛋白的克隆、表达及生物学活性研究[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
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5	蔡斌;林毅;薛偕华;方玲;吴志英;王柠;;TAT-Ngb融合蛋白的原核表达及其对小鼠脑缺血影响的研究[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
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7	于海鹏;刘丹;薛雁;盛军;;表达HBsAg及rhIFNa-2b融合蛋白的人参细胞株的建立[A];吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集[C];2008年
8	李国辉;梁英民;韩骅;何飞;康志杰;黄斯勇;徐恒;张丽;伍艳兰;牛晓丽;马长升;;融合蛋白hJagged1ext-Fc毕赤酵母表达载体的构建及表达[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
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10	赖德辉;李逊;雷鸣;曾国华;袁坚;吴文起;何永忠;何朝晖;;基因工程构建表达融合蛋白GST-FCoAT的益生大肠杆菌Nissle1917-Frc[A];第十七届全国泌尿外科学术会议论文汇编[C];2010年

中国博士学位论文全文数据库

前10条

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2	王玉梅;嵌合降钙素基因的构建及表达[D];中国海洋大学;2005年
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4	吴敏;人血清白蛋白融合技术平台的共性与个性问题研究[D];浙江大学;2013年
5	孟巧红;家蚕表达的绿色荧光蛋白标记的霍乱毒素B亚基与人胰岛素融合蛋白抗1型糖尿病的研究[D];浙江大学;2011年
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7	彭明丽;人oGPCRs-Gi1α融合蛋白的表达及GPR80的功能初探[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
8	王春艳;组蛋白H4融合蛋白载体用于肿瘤基因治疗的研究[D];吉林大学;2010年
9	赵志平;光合细菌Rhodobacter sphaeroides新型异源蛋白表达体系的构建及其应用研究[D];重庆大学;2011年
10	任桂杰;副粘病毒F蛋白特异性膜融合功能的研究[D];山东大学;2005年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	陈喆;幽门螺杆菌尿素酶B亚单位和细胞空泡毒素基因的克隆，表达和其融合蛋白免疫反应性的研究[D];浙江大学;2002年
2	万一;人TNF-α自体疫苗的研究[D];第四军医大学;2004年
3	逄媛;猪源产肠毒素性大肠杆菌K88、K99，987P、F41双基因串联表达的研究[D];山东农业大学;2008年
4	陈小颖;ω-芋螺毒素M ⅦA的表达与纯化[D];浙江大学;2004年
5	徐忠林;共表达NDV F 基因与H9亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力[D];扬州大学;2005年
6	王刚;志贺毒素B亚单位与柯萨奇病毒B组3型VP1融合DNA疫苗的构建及其免疫效果的观察[D];河北医科大学;2005年
7	刘楠;重组HSA/Tα1融合蛋白在毕赤酵母表达及纯化研究[D];吉林大学;2009年
8	梁桂芳;IER5原核表达载体的构建及融合蛋白表达、纯化[D];河北医科大学;2010年
9	白彦霞;营养相关基因(fdr3和TaNRT1)功能的进一步研究[D];首都师范大学;2000年
10	张丽青;TrxA-EstB1融合蛋白的表达、纯化与活性分析[D];山东农业大学;2003年

中国重要报纸全文数据库

前2条

1	记者白毅;我国发现SARS病毒借助胞膜“脂筏”进入宿主细胞[N];中国医药报;2008年
2	记者刘钢;黄病毒入侵细胞机理被揭示[N];新华每日电讯;2008年

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