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H_2O_2诱导ARPE-19细胞损伤模型的建立及蓝莓花青素的保护作用

吴寒  HUTABARAT Ruth Paulina  黄午阳  
【摘要】:目的建立H_2O_2诱导视网膜色素上皮细胞ARPE~(-1)9(acute retinal pigment epithelial~(-1)9)细胞损伤模型,研究蓝莓花青素对细胞的保护作用。方法采用MTT法测定细胞存活率,免疫荧光法测定细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。以浓度0~3 200μmol·L~(-1)的H_2O_2为诱导剂,刺激细胞2、6、24 h,用1、5、10 mg·L~(-1)花青素提取物(blueberry anthocyanin extract,BAE)预处理细胞6、24 h,比较对细胞的保护作用,确定H_2O_2的浓度及诱导时间。通过ARPE~(-1)9细胞损伤模型的建立,研究蓝莓花青素对细胞的保护作用。结果以800μmol·L~(-1)H_2O_2刺激2 h为条件,建立ARPE~(-1)9细胞损伤模型,细胞存活率为63.69%。5 mg·L~(-1)蓝莓花青素提取物、锦葵色素(malvidin,Mv)及其葡萄糖苷(malvidin-3-glucoside,Mv-3-glc)和半乳糖苷(malvidin-3-galactoside,Mv-3-gal)预处理6 h后,细胞存活率明显提高(P0.01),分别达到86.57%、115.72%、98.15%、127.97%;细胞中ROS水平明显下降(P0.05),依次减少52.38%、95.38%、77.55%、116.09%。结论蓝莓花青素可以有效抑制H_2O_2诱导产生的视网膜细胞氧化损伤,其中主成分锦葵色素及其糖苷发挥重要作用。

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