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MicroRNA-223在淋巴细胞白血病原代细胞中表达及作用机制的研究

南祯  梁勇  付蓉  刘惠  阮二宝  王晓明  王国锦  瞿文  刘鸿  吴玉红  宋嘉  邢莉民  关晶  李丽娟  王化泉  邵宗鸿  
【摘要】:本研究旨在探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)原代细胞中MicroRNA-223与LMO2基因的表达水平及MicroRNA-223的作用机制。应用人淋巴细胞分离液分选ALL、CLL患者及正常人骨髓中淋巴细胞,在ALL、CLL患者骨髓淋巴细胞中转染MicroRNA-223的类似物靶向升高细胞中MicroRNA-223的表达,在正常人骨髓淋巴细胞中转染MicroRNA-223抑制物靶向敲低细胞中MicroRNA-223的表达。转染后培养72 h,用RT-PCR方法检测转染前后MicroRNA-223和LMO2表达量及其相关性,并用流式细胞术进一步观察细胞凋亡和细胞周期的变化。结果表明,转染MicroRNA-223类似物前,ALL、CLL患者中MicroRNA-223表达水平为(433.11±144.88),LMO2水平为(807.10±238.41),正常人转染MicroRNA-223抑制物前,MicroRNA-223表达水平为(949.59±267.39),LMO2的表达为(455.32±176.83);MicrRNA-223的表达在正常人中明显高于ALL、CLL患者(P0.05),而LMO2的表达在正常人中明显低于ALL、CLL患者(P0.05)。转染后,ALL、CLL患者中MicroRNA-223表达明显增加(571.86±142.00)(P0.05),而LMO2表达明显减少(651.97±230.12)(P0.05);在正常人中MicroRNA-223表达明显降低(646.32±172.93)(P0.05),LMO2的表达明显升高(541.27±158.86)(P0.05)。转染后细胞周期及细胞凋亡率的变化表现为,在ALL、CLL患者转染前细胞周期G1/G2细胞比例为(94.75±3.15)%,S期为(5.14±3.12)%;转染后G1/G2细胞比例明显增加(97.03±2.08)%(P0.05),在S期明显减少(2.97±2.08)%(P0.05);转染前细胞凋亡率为(54.47±8.72)%,转染后为(60.48±8.81)%,后者明显增加(P0.05)。正常人转染前细胞周期G1/G2细胞比例是(96.73±2.26)%,S期是(3.25±2.26)%;转染后G1/G2细胞比例明显减少(94.55±2.77)%(P0.05),在S期明显增加(5.45±2.77)%(P0.05),细胞凋亡率为(59.02±10.20)%,转染后明显减少(51.96±10.20)%(P0.05)。结论:淋巴细胞白血病原代细胞中MicroRNA-223表达降低,LMO2表达增高,导致淋巴细胞增殖周期及凋亡异常,这可能是淋巴细胞白血病的发病机制之一。

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