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PTEN基因对兔晶状体上皮细胞增殖抑制作用的实验研究

赵宁  张瑞君  刘磊  李佳  刘宁宁  
【摘要】:目的研究白内障术后晶状体上皮细胞增殖过程中是否存在PTEN基因对PI-3k/PKB信号转导途径的抑制作用,为后发性白内障的防治提供实验依据。方法将健康白色家兔42只(84眼)随机分入实验组(36只)和对照组(6只)。实验组兔行双眼透明晶状体皮质吸出术,对照组不做处理。在术后1 d、3 d、1周、2周、1个月和2个月各处死随机选择的6只实验组兔。应用免疫组织化学、原位杂交和RT-PCR方法检测赤道部晶状体上皮细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及PTEN mRNA、PKB mRNA、Ser473-R的表达。结果对照组赤道部LEC核可见PCNA弱阳性表达,实验组术后1d时吸光度(A)值迅速升高为0.86±0.02,与对照组相比,差异有显著统计学意义(P0.001);术后1~7 d PCNA的表达维持在高水平状态;2周后,随着时间的延长,PCNA表达逐渐减弱;术后1个月、2个月时大致恢复至术前状态。对照组兔晶状体上皮细胞胞浆中有PTEN mRNA的表达,吸光度值(A)为0.54±0.03。实验组术后1 d PTEN mRNA相对含量明显下降为0.20±0.02(P0.001),术后1周时略有恢复0.25±0.04(P0.001),术后1个月时恢复术前水平0.53±0.04(P0.001)。PKB mRNA的表达恒定,对照组与实验组各时间点差异均无统计学意义(均为P0.05)。对照组晶状体上皮细胞中Ser473-R的表达较少(0.15±0.01),实验组术后1 d时Ser473-R的吸光度(A)值迅速升高为0.54±0.03,两组差异有显著统计学意义(P0.001);术后1~3 d Ser473-R的表达维持在高水平状态;1周时,Ser473-R表达开始减弱;术后1个月、2个月时大致恢复术前状态。PTEN mRNA与PCNA的表达呈负相关(r=-0.954,P0.001);PKB mRNA相对含量与PCNA表达呈负相关(r=-0.319,P=0.039);Ser473-R与PCNA的表达呈显著正相关(r=0.955,P0.001);Ser473-R与PTEN mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.969,P0.001)。结论 PTEN mRNA在正常兔晶状体上皮细胞中有表达,在白内障术后,它可能通过抑制PI-3k信号转导途径中的磷酸化过程而抑制晶状体上皮细胞的增殖。

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