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过氧化氢体外诱导细粒棘球绦虫囊泡氧化损伤模型的建立

文丽梅  巩月红  吕国栋  张嘉伟  王建华  
【摘要】:目的建立过氧化氢(H_2O_2)体外诱导细粒棘球绦虫囊泡氧化损伤模型。方法采用终浓度为0、1、2、5 mmol/L的活性氧清除剂-N-乙酰半胱氨酸(NAC)对细粒棘球绦虫囊泡预先干预2 h,再分别用终浓度为0、50、100、200、400μmol/L的H_2O_2处理囊泡0.5 h,用活性氧检测试剂盒对囊泡体内的活性氧含量进行检测;采用激光共聚焦对1%二甲基亚砜(DMSO)、50μmol/L H_2O_2、100μmol/L H_2O_2、200μmol/L H_2O_2、200μmol/L H_2O_2+5 mmol/L NAC和5 mmol/L NAC干预0.5 h的囊泡进行体内活性氧观察并拍照;干预囊泡4 d,每天对囊泡的塌陷率进行统计;采用电镜对干预4 d后的囊泡超微结构进行观察。结果随着H_2O_2浓度的升高,囊泡体内的活性氧含量逐渐升高;H_2O_2和NAC干预囊泡后囊泡塌陷率结果显示H_2O_2单独及H_2O_2与NAC联合干预囊泡均可导致囊泡的活性降低,而H_2O_2和NAC联合干预囊泡可明显改善H_2O_2单独对囊泡的塌陷率的降低;电镜对H_2O_2和NAC干预囊泡后的超微结构观察结果显示H_2O_2可导致囊泡体内异染色质的增多,而NAC可缓解H_2O_2对囊泡体内异染色质的增多;激光共聚焦结果与活性氧含量检测结果一致。结论采用200μmol/L H_2O_2可诱导囊泡产生氧化损伤作用,且5 mmol/L NAC可有效的抑制H_2O_2诱导的氧化损伤作用,H_2O_2诱导囊泡氧化损伤模型的建立为抗包虫病药物氧化损伤作用研究奠定基础。

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