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黄曲霉素产毒真菌ver-1、ver B及ITS基因序列多重PCR体系的优化

潘锋君  叶垚敏  张晓芹  
【摘要】:目的 对黄曲霉素产毒真菌的多重PCR体系进行优化,确定最佳PCR体系。方法 以黄曲霉素产生过程中的主要调控基因ver-1、verB及通用基因片段ITS序列为目的片段,设计多重PCR引物,采用单因素和正交优化试验,对DNA模板、Mg~(2+)浓度、引物用量、dNTPs用量、退火温度等因素进行考察。结果 最佳多重PCR体系为:50μL体系中含有引物(5μmol·L~(-1))3μL,dNTPs(2.5mmol·L~(-1))5μL,Mg~(2+)(2.5mmol·L~(-1))4μL,DNA浓度10ng·μL~(-1),退火温度56℃。结论 建立的体系可用于黄曲霉素产毒真菌的多重PCR鉴定,对黄曲霉产毒菌的源头鉴定具有一定的意义。

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