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瘦素受体在小鼠皮肤中表达及瘦素受体阳性细胞在皮肤发育和创伤愈合中的作用

王傲  褚宏尚  吴红光  李科  刘慧娟  
【摘要】:背景:最近研究发现瘦素受体可以标记小鼠成体骨髓间充质干细胞,并参与小鼠骨折后骨的再生和修复,但是皮肤中是否存在瘦素受体阳性间质细胞,以及瘦素受体阳性细胞在皮肤发育和损伤修复中是否有重要作用并不清楚。目的:探究瘦素受体在小鼠皮肤中的表达以及瘦素受体阳性细胞在皮肤发育和创伤愈合中的作用。方法:该实验经上海交通大学实验动物伦理与使用委员会批准,批准号为1504002。利用经典的Cre-loxP系统构建LepR-Cre; tdTomato小鼠,示踪瘦素受体在小鼠皮肤中的表达。借助流式细胞仪对Tomato阳性瘦素受体谱系细胞进行细胞表面标记物分析。在LepR-Cre; tdTomato小鼠背部构建全层皮肤切除创伤模型,追踪瘦素受体阳性细胞在皮肤创伤愈合过程中的分布。构建在瘦素受体谱系细胞中特异性敲除Tsc1的LepR-Cre; Tsc1~(fl/fl)小鼠,探究Tsc1对小鼠皮肤发育的影响。结果与结论:(1)瘦素受体在小鼠皮肤的真皮乳头、间质和真皮白色脂肪层均有表达;(2)免疫荧光染色发现瘦素受体可以与间质细胞标记物Vimentin和脂肪细胞标记物Perilipin部分共标。细胞表面标记物分析发现瘦素受体谱系细胞为CD11b~-CD45~-CD31~-,同时表达间充质干细胞标记物CD73、Sca-1,即瘦素受体标记皮肤中的一类间充质干细胞;(3)LepR-Cre; tdTomato小鼠皮肤打孔的研究发现瘦素受体阳性细胞参与皮肤创伤愈合的进程;(4)在瘦素受体谱系细胞中敲除Tsc1后,小鼠皮肤真皮层和真皮白色脂肪层厚度增加、脂肪细胞数量增多。总的来说,该研究证实了瘦素受体在小鼠皮肤中表达,且在皮肤中瘦素受体谱系细胞参与组织发育及损伤修复。

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