收藏本站
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

巨噬细胞集落刺激因子/核因子κB受体激活物配体体外诱导培养高纯度破骨细胞:最佳剂量探讨

包洪卫  孙继芾  王青  
【摘要】:背景:巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stlimulating factor,M-CSF)/核因子κB受体激活物配体(receptor activatorof nuclear kappa B ligand,RANKL)两种细胞因子协同诱导骨髓干细胞形成破骨细胞是一种较新的,可以获取较高纯度和数量破骨细胞的诱导培养法,但尚缺乏统一的培养标准。目的:建立有效的M-CSF/RANKL诱导小鼠骨髓干细胞诱导分化破骨细胞的培养体系。方法:分离小鼠四肢骨获取骨髓干细胞。将小鼠骨髓干细胞在含有M-CSF的α-MEM培养基中培养24h,调整细胞浓度为107,108,109L-1。然后在培养基中同时加入10μg/LM-CSF和不同质量浓度(20,50,100μg/L)RANKL。行抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察干细胞向破骨细胞的转变过程及细胞形态和染色情况,并对各组染色阳性的破骨细胞进行计数,比较不同诱导条件对破骨样细胞数量的影响。结果与结论:培养3d后可见少量破骨样细胞,胞质内含许多红色抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性颗粒,细胞内可见淡染的双核;培养6d后可见大量染色阳性破骨样细胞;培养9d后出现多核巨型染色阳性破骨样细胞,细胞明显增大,细胞核可达到3个以上。在固定细胞接种浓度条件下,RANKL质量浓度为100μg/L时诱导分化形成的破骨样细胞数量较另两质量浓度增多(P0.05);在固定RANKL质量浓度条件下,细胞浓度为108L-1时诱导分化形成的破骨样细胞数量较另两细胞接种浓度增多(P0.05);细胞接种浓度为108L-1,RANKL质量浓度为100μg/L时诱导分化形成的破骨样细胞数量高于其他条件组合(P0.05)。说明在M-CSF/RANKL诱导小鼠骨髓干细胞分化培养破骨细胞的体系中,RANKL最佳质量浓度为100μg/L,最佳细胞接种浓度为108L-1。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 李俊宁;袁晓军;徐文华;傅云根;曹盛生;;假体磨损颗粒钴铬离子影响成骨细胞增殖及RANKL、骨保护素的表达[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年30期
2 ;[J];;年期
3 ;[J];;年期
4 ;[J];;年期
5 ;[J];;年期
6 ;[J];;年期
7 ;[J];;年期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
11 ;[J];;年期
12 ;[J];;年期
13 ;[J];;年期
14 ;[J];;年期
15 ;[J];;年期
16 ;[J];;年期
17 ;[J];;年期
18 ;[J];;年期
19 ;[J];;年期
20 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张凌云;曲秀娟;刘云鹏;;C-src参与RANKL诱导的乳腺癌细胞迁移(英文)[A];2010’全国肿瘤分子标志及应用学术研讨会暨第五届中国中青年肿瘤专家论坛论文汇编[C];2010年
2 刘臻;邱勇;孙强;吴洁;陈军浩;陈蕾蕾;马薇薇;;RANKL/OPG在青少年特发性脊柱侧凸患者低骨量发生机制中的作用[A];第八届全国脊柱脊髓损伤学术会议论文汇编[C];2007年
3 杜文喜;童培建;;体外破骨细胞培养的影响因素和分子机制研究进展[A];全国中西医结合学会骨伤科专业委员会第十二次学术年会浙江省中西医结合学会骨伤科专业委员会第十次学术年会论文汇编[C];2004年
4 刘慧;许兵;童培建;肖鲁伟;;激素性股骨头坏死大鼠血清骨代谢相关因子的变化及意义[A];第十八届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编[C];2011年
5 李大金;;中西医结合骨免疫学[A];2010全国中西医结合围绝经期专题学术会议论文集[C];2010年
6 刘胜;吴春宇;程旭锋;杨顺芳;宋晓耘;;从OPG/RANKL/RANK系统阐述补骨脂-蛇床子抑制乳腺癌骨转移的机制[A];2011年中医外科学术年会论文集[C];2011年
7 丁悦;;骨质疏松症与骨性关节炎相关性的研究进展[A];中华医学会第三次骨质疏松和骨矿盐疾病中青年学术会议论文汇编[C];2011年
8 李民;郭逸尔;刘献祥;陈文列;林久茂;黄云梅;黄梅雅;吴追乐;;透骨消痛胶囊干预膝骨性关节炎软骨下骨重塑的分子机制探讨[A];首届全国中西医结合骨科微创学术交流会暨专业委员会成立大会论文汇编[C];2011年
9 薄占东;杨亚东;谭桢;;选择性感觉/运动神经切断对大鼠胫骨骨折愈合影响的实验研究[A];第十八届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编[C];2011年
10 黄立中;田莎;王云丹;伍参荣;彭吉勇;;阳和汤对裸鼠移植性乳腺癌骨转移模型的作用及相关调节因子的影响[A];2011年中华名中医论坛暨发挥中西医优势防治肿瘤高峰论坛论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 唐振宁;RANKL/RANK途径对人乳腺癌细胞迁移作用及其调节机制的研究[D];第三军医大学;2011年
2 王浩;靶向IL-1和RANKL的联合基因治疗磨损颗粒导致的无菌性假体松动的研究[D];山东大学;2012年
3 刘海英;人脐血间充质干细胞移植对大鼠中枢神经系统损伤的影响研究[D];河北医科大学;2006年
4 吴丹凯;Runx2基因对骨肉瘤细胞的生物学的影响及相关体内和体外机制的研究[D];吉林大学;2008年
5 陶惠人;RANKL,PTHrP及P38 MAP Kinase在破骨细胞生成和骨吸收中的作用[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
6 黄钢勇;脑灰质促进成骨的机制研究[D];复旦大学;2010年
7 敖建华;6-羟多巴胺诱导的去交感神经支配对大鼠骨代谢的影响[D];第四军医大学;2010年
8 刘继中;人骨保护素的表达及生物活性研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
9 鲁世金;应用小干扰RNA研究ERβ在青春期椎体线性生长中的作用[D];中南大学;2011年
10 张锴;SCID-Hu模型建立及循环血单核细胞对假体周围组织形成的影响[D];山东大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 袁晓军;金属(钴、铬)离子诱导成骨样细胞RANKL/OPG表达及其信号转导分子机制的实验研究[D];南昌大学;2010年
2 熊皞;静磁场对钴、铬离子作用下成骨细胞活力及其分泌RANKL、OPG的实验研究[D];南昌大学;2011年
3 刘钊;孕激素及雌激素对乳腺癌细胞RANKL及其受体介导的骨转移的调节作用[D];南京医科大学;2011年
4 孟超;人工髋关节置换手术前后外周血中OPG与RANKL浓度分析[D];安徽医科大学;2012年
5 王信;诱导小鼠破骨前体细胞成熟分化的实验条件探讨[D];重庆医科大学;2011年
6 李旎;胞质M-CSF对人乳腺癌MCF-7细胞抗肿瘤药物抗性的影响[D];南华大学;2010年
7 朱沈群;胞质M-CSF对MCF-7细胞多药耐药相关miRNA表达与凋亡的影响[D];南华大学;2012年
8 刘少志;胞质M-CSF通过PI3K增强mdr-1表达和外排功能介导人乳腺癌MCF-7细胞对阿霉素耐药[D];南华大学;2011年
9 周鹏;TRAIL及RANKL联合治疗骨肉瘤的试验研究[D];华中科技大学;2006年
10 殷刚;青少年特发性脊柱侧凸患者成骨细胞中核因子κB受体活化子配体和骨保护蛋白的表达[D];南京医科大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前2条
1 实习生 蒋洪涛;激素治疗应慎重,别让乳腺癌瞄上你[N];科技日报;2010年
2 张宇 译;新型抗骨质疏松症药物可降低骨折风险[N];中国医药报;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978