人胚神经干细胞的长期体外培养

【摘要】：目的:建立人胚神经干细胞(humanNeuralStemCells,hNSC)的体外培养体系。方法:选取3个月～4个月大的引产胎儿,分离原代人胚神经干细胞,添加碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、N2促进hNSC的增殖,使用免疫细胞化学方法与诱导分化实验鉴定其神经干细胞的特性。结果:成功培养出人胚神经干细胞,原代培养的hNSC悬浮生长,似桑椹状,表达巢蛋白(Nestin)抗原,诱导分化后可表达神经元与神经胶质细胞特异抗原βⅢ与神经胶质细胞特异抗原GFAP,并能自我增殖,目前已成功传代10余次(5月余)。结论:使用本方法可以获得大量纯化hNSC,为临床实验提供适合的移植材料。