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脊髓Toll样受体4和热休克蛋白90参与电针缓解大鼠慢性神经病理性疼痛机制研究

高永辉  王俊英  韩焱晶  刘俊岭  
【摘要】:目的:观察电针对坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)大鼠脊髓中Toll样受体4(TLR4)及热休克蛋白90(HSP90)表达的影响,探讨脊髓TLR4及HSP90参与电针缓解慢性神经病理性疼痛的机制。方法:Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、电针组、抑制剂组和电针+抑制剂组。结扎大鼠坐骨神经造成CCI疼痛模型。电针组于CCI术后7 d电针双侧"足三里""阳陵泉"(1 mA,2 Hz/15 Hz, 30 min/次,1次/d),连续5 d;抑制剂组以及电针+抑制剂组分别于每日及每日电针前给予大鼠颈部皮下注射HSP90抑制剂格尔德霉素(50μg/kg),连续5 d。用足底测痛仪测定大鼠双足缩腿反应潜伏期(PWL);用Western blot法检测腰(L)2—L4段脊髓中TLR4和HSP90蛋白的表达;酶联免疫吸附法检测大鼠L2—L4段脊髓中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;用免疫荧光双标记法检测大鼠L2—L4段脊髓中TLR4在小胶质细胞和神经元上的分布。结果:干预后,与正常组比较,模型组大鼠患健侧PWL差值(PWLD),脊髓中TLR4和HSP90表达,IL-1β和TNF-α含量,离子钙接头蛋白分子1(Iba1)和TLR4共表达细胞比例明显增大(P0.01,P0.05)。与模型组比较,电针组、抑制剂组和电针+抑制剂组大鼠的PWLD,IL-1β和TNF-α含量,Iba1和TLR4共表达细胞比例明显降低(P0.05);电针组HSP90的表达明显升高(P0.05),神经元核抗原(NeuN)和TLR4共表达细胞比例明显升高(P0.05);抑制剂组和电针+抑制剂组TLR4和HSP90表达明显降低(P0.05)。与电针组比较,抑制剂和电针+抑制剂组大鼠的PWLD,TLR4和HSP90表达,NeuN和TLR4以及Iba1和TLR4共表达细胞比例明显降低(P0.05)。电针+抑制剂组NeuN和TLR4共表达细胞比例高于抑制剂组(P0.05)。结论:电针"足三里""阳陵泉"穴可缓解CCI大鼠的神经病理性疼痛,其效应可能与对脊髓小胶质细胞和神经元中TLR4的调节有关,脊髓中HSP90可能是电针通过调节TLR4抑制神经病理性疼痛的协同刺激分子。

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