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BCL3转录共激活因子的亚细胞定位研究

谢业成  郭仪琳  李雪露  高静涛  张硕  段良伟  牛玉娜  
【摘要】:BCL3转录共激活因子(BCL3 transcription coactivator)通过与p50或p52同型二聚体结合,发挥调节细胞周期、促进细胞存活和抗细胞凋亡的生物学功能。BCL3基因的异常表达与多种恶性肿瘤的发生、发展相关。研究表明,BCL3在细胞中的定位与功能相关,然而其亚细胞定位和调节机制尚不清楚。该研究旨在探讨BCL3蛋白在HeLa细胞中的亚细胞定位。首先,通过数据库和在线软件预测BCL3的亚细胞定位;然后,构建BCL3的缺失突变体表达质粒,用其转染HeLa细胞,利用Western blot检测蛋白表达情况;最后,用间接免疫荧光实验标记高尔基体、线粒体和内质网,共聚焦荧光显微镜观察BCL3与细胞器的共定位情况。结果表明,BCL3在细胞中分别呈现弥散状、斑点状和核定位型三种形状;N-端结构域(134–237 aa)在BCL3蛋白的核定位中起决定性作用,C-端结构域(338–454 aa)影响BCL3蛋白形成斑点状;BCL3与内质网呈现高比例的共定位。该研究揭示了BCL3的亚细胞定位及其决定结构域,为深入研究该分子的功能奠定了基础。

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