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LiCl诱导大鼠脂肪基质细胞成骨分化研究

高倩  赵丽丽  宋子仪  王少璞  张雅卿  杨公社  
【摘要】:【目的】探讨体外培养条件下,LiCl诱导大鼠脂肪基质细胞向成骨细胞分化的潜能。【方法】采用Ⅰ型胶原酶消化组织块法分离获得大鼠脂肪基质细胞,将其分为处理组和对照组,分别用25 mmol/L LiCl和25mmol/L NaCl处理3周,采用形态学、SQ RT-PCR、免疫荧光染色、碱性磷酸酶染色及茜素红染色等方法,检测大鼠脂肪基质细胞向成骨细胞分化的能力。【结果】大鼠脂肪基质细胞在LiCl诱导24 h后,细胞形态由成纤维样变成方块状;诱导3周后,SQ RT-PCR检测发现,细胞表达碱性磷酸酶(AP)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)和骨γ羧基谷氨酸(Bglap)等成骨细胞特异性基因,与处理0 d相比,差异达极显著水平(P0.01),碱性磷酸酶和茜素红染色均呈阳性,其中茜素红染色阳性率可达60%以上;免疫荧光染色检测结果显示,LiCl处理3周后细胞表达成骨细胞特异性蛋白OSX和OPN,阳性率均达70%左右。对照组碱性磷酸酶和茜素红染色均呈阴性,不表达成骨细胞相关基因及蛋白。【结论】大鼠脂肪基质细胞在25 mmol/L LiCl处理下,可分化为成骨样细胞,且表达成骨细胞标志基因及相关蛋白。

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